在選擇凝膠成像系統時,我們關注的問題通常有以下一些方面:
1、為什么需要制冷CCD,它適用于哪些情況?在曝光超過5-10秒時,CCD芯片就會發熱,沒有致冷設備的芯片,“熱”或者白的像素點就會遮蓋圖像,圖像到處可見雪花。在相同滿井電子的CCD情況下,降低CCD噪音,就能提高CCD的監測能力,熱或者暗電流對于CCD都是噪音,噪音在制冷 CCD中基本都可以被深度致冷的Peltier消除。 CCD結構設計、數字化的方法等都會影響噪音的產生。當然通過改善結構、優化方法,同樣能減少噪音的產生。制冷CCD的適用性:熒光及化學發光本身較弱,所以對CCD噪音的降低要求很高,應選用高分辨率數字冷卻CCD相機結合高通透鏡頭系統,使其能夠捕獲到信號極其微弱的熒光及化學發光樣品圖像,并且能夠zui大程度的降低噪音,減少背景,提供出色的圖像清晰度。另外可選激發光源及多位濾鏡輪擴大了熒光/化學發光成像的應用范圍。所以一般在熒光及化學發光觀察時需要選擇制冷CCD。所以制冷CCD相機是分子影像成像分析系統的未來的發展趨勢和必須要求。
2、什么是信噪比和暗電流,它與CCD有什么關系?提到制冷CCD ,我們就必須提到另外一個參數就是信噪比, 圖象的信噪比應該等于信號與噪聲的功率譜之比;說到信噪比就不得不提到暗電流了,因為暗電流是導致CCD噪音的很重要的因素。暗電流指在沒有曝光的情況下,在一定的時間內,CCD傳感器中像素產生的電荷。我們在做化學發光檢測的時候,需要的曝光的時候比較長,這樣導致CCD產生較多的暗電流,對圖像的質量影響非常大。通常情況下,通過降低CCD的溫度來zui大限度的減少暗電流對成像的影響。CCD產生的暗電流隨著溫度下降而減少,但是在-23℃下曲線開始趨于平緩,由此可以看出溫度并非需要無休止的降低的。所以在選擇冷CCD時,溫度在-25℃(溫度,非室溫以下)下一般就可以達到您的要求了。有的CCD是在圖像zui終生成后,通過軟件去背景來扣除暗電流,對于信號遠遠強于背景的有一定效果,但是對于弱信號處理過程中會產生越來越多的錯誤。
3、什么是量子效率? CCD的量子效率也稱像素靈敏度,指在一定的曝光量下,像素勢阱中所積累的電荷數與入射到像素表面上的光子數之比。不同結構的CCD其量子效率差異很大。值得注意的是CCD 的量子效率與入射光的波長有關。動態范圍的值越高CCD性能越好.
4、如何選擇光學鏡頭?光學鏡頭是機器視覺系統中*的部件,直接影響成像質量的優劣,影響算法的實現和效果。光學鏡頭規格繁多,有時不免頭暈。光學鏡頭從焦距上可分為短焦鏡頭、中焦鏡頭,長焦鏡頭;從視場大小分有廣角、標準,遠攝鏡頭;結構上分有固定光圈定焦鏡頭,手動光圈定焦鏡頭,自動光圈定焦鏡頭,手動變焦鏡頭、自動變焦鏡頭,自動光圈電動變焦鏡頭,電動三可變(光圈、焦距、聚焦均可變)鏡頭等。
5、常用的數據傳輸的方式是什么? IEEE1394總線是一種目前為止zui快的高速串行總線,火線(IEEE1394)支持的傳輸速率有100Mbps,200Mbps,400Mbps,zui高的傳輸速度為400Mbps/s。對于各種需要大量帶寬的設備提供了專門的優化,接口可以同時連接63個不同設備,IEEE1394同USB一樣,支持帶電插撥設備。IEEE1394同樣支持即插即用,現在的WIN98 SE、WIN2000、WIN ME、WIN XP都對IEEE1394支持的很好,在這些操作系統中用戶不用再安裝驅動程序,也能使用IEEE1394設備。1.軟件功能包括哪幾個方面?選擇好成像系統后,配套的軟件選擇也很重要。硬件設備再好,如果不配上好的軟件,也無法發揮它應有的功能。作為凝膠成像系統軟件功能和用途都基本相似,這里我們介紹一下zui關注的幾個特點: A、軟件的基本功能:可對不同樣品,如條帶,斑點,細菌克隆,芯片,細胞或者活體動物等,進行定性、定量分析,加批注,輸出圖像等操作。 B、圖像采集方式:對于化學發光或多色熒光產品,軟件應具備電影模式,可以進行圖像多禎累計功能來增強線性動態范圍和數據準確度。 C、操作簡便,軟件應具備操作輔助工具,使軟件操作更簡單易用。采用三步式泳道及條帶分析,可以快速計算蛋白質和核酸的分子量及含量。 D、數據庫功能也是*的,這樣可以檢索、分類或比較所有生成的圖像。可利用不同的顯示算法程序圖像化顯示條帶差異。 E、曝光方式:應采用單一曝光、多重曝光,累計曝光,延時(定時)曝光多種模式可選。 F、記憶功能:軟件能記憶并自動調用成像數據,這樣你不用每次設置就能獲得重復性好的結果。 G、軟件應配備兩套以上,使用單機版,多用戶版或網絡版,用戶可彼此獨立操作,互不干擾,互不混淆。
6、為何要采用自動變焦鏡頭,有何意義?自動變焦鏡頭無需手動調節,可操作性強,同時也減少了EB潛在的污染機會。再者使得將CCD內置成為了可能,從而達到防灰防塵防震的目的,更好地保護了核心部件延長產品的使用壽命。
7、紫外對人體有傷害,是否具有防護措施?紫外對人體,特別是眼睛有一定傷害,TOCAN凝膠成像系統具備紫外防護設施,在紫外燈開啟的狀態下,如不慎打開暗箱,紫外燈會自動熄滅防止對人體的傷害。
8、能否在凝膠成像上直接切膠? TOCAN凝膠成像可以,如需直接切膠,首先按系統中間的觀察窗,打開裝有進口防紫外玻璃的觀察窗口,然后打開左右兩側專為割膠所設計的小門,即可進行切膠操作。
9、如何調節焦距,聚焦,光圈以獲得高質量的圖片?三個zui重要的可調參數分別是焦距,聚焦和光圈。其中焦距調節清晰度,聚焦調節圖像大小,光圈調節明暗。一般先把光圈調節到適宜的亮度后,再調節聚焦將圖像放到zui大,zui后調解焦距,在圖像較大的情況下焦距比較容易調節到zui清晰狀態,然后再把圖像縮放在適宜大小后成像即可。
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