詳述分光光度計的具體分類及應(yīng)用

分光光度計，又稱光譜儀，是將成分復(fù)雜的光，分解為光譜線的科學(xué)儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200～380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜：鎢燈光源所發(fā)出的380～780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后，可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜；該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

分光光度計是一種分析測量光譜的儀器，因?yàn)閼?yīng)用需求的不同，分光光度計有著不同的種類。分光光度計按照波長及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為：

(1)可見光分光光度計
(2)紫外分光光度計
(3)紅外分光光度計
(4)熒光分光光度計
(5)原子吸收分光光度計。

現(xiàn)今生命科學(xué)領(lǐng)域比較流行的*微量分光光度計是屬于紫外分光光度計的一種。

(1)可見分光光度計

用來測量待測物質(zhì)對可見光(400～760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器，稱為可見分光光度計。可在600nm測定細(xì)菌細(xì)胞密度。

(2)紫外可見分光光度計

紫外可見分光光度計用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200～760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度，也可以測定細(xì)菌細(xì)胞密度。紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。

a) 單光束：適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。

b) 雙光束：自動記錄，快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜，價格較高。

c) 假雙光束也就是比例雙光束，它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束，一束直接到達(dá)檢測器，另一束通過樣品后到達(dá)另一個檢測器。這種儀器的優(yōu)點(diǎn)是可以監(jiān)測光源變化帶來的誤差，但是并不能消除參比造成的影響。 
(3)紅外分光光度計

一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜，這是研究有機(jī)化合物較為常用的光譜區(qū)域，能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。

紅外光譜法的特點(diǎn)是：快速、樣品量少(幾微克-幾毫克)，特征性強(qiáng)(各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。 
(4)熒光分光光度計

熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域。

通過對這些參數(shù)的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。

(5)原子吸收分光光度計 
主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一。是材料分析及質(zhì)量控制部門進(jìn)行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。

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