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目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。亞磷酰胺三酯法合成DNA的片段，具有高效、快速的偶聯以及起始反應物比較穩定的特點。亞磷酰胺三酯法是將DNA固定在固相載體上完成DNA鏈的合成的，合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的，相鄰的核苷酸通過3′→5′磷酸二酯鍵連接。
引物合成特點：
1.引物合成的純度高。
2.合成的序列長。
3.合成的效果好。
引物OD數的定量：
用紫外分光光度計，波長260nm，石英比色杯，光程為1厘米，測定溶液的光密度。測定時溶液的光密度稀釋到0.2-1.0之間。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后，用1ml水稀釋測OD值。需要根據稀釋倍數換算出母液的OD值
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