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1脫蠟:65度30分鐘,二甲苯脫蠟 5min×2次
2水化:將脫蠟后的切片經100%酒精,95%酒精,85%酒精,75%酒精,雙蒸水各3min
3溫熱水漂洗:30-40℃溫熱水漂洗,每次30-60秒,共兩次。(可以分兩缸溫熱水進行漂洗,直至玻片上除樣本以外,其余部分均沒有顆粒狀水珠為止。)
4 染色前先用蒸餾水潤濕玻片30~60秒。
5 R1核染液(試劑盒提供)染色60s左右,倒丟,沖洗液沖洗30s左右。
6 R2漿染液(試劑盒提供)染色30-60s,倒丟,沖洗液沖洗30s左右。
7 R3黃色分色液(試劑盒提供)分色6-8min左右(鏡下觀察樣本中膠原纖維部分褪成淡粉紅色為宜。如果褪色效果不佳,可適當延長時間,使得膠原纖維更易著色)。棄去分色液,(注意不需沖洗)。
8 直接用R4藍色復染液(試劑盒提供)染色5min左右,倒丟,用無水乙醇沖洗干凈。
9 放入烘箱(50-60攝氏度)烘干,中性樹膠封片。
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