上海乾思生物公司人β內酰胺酶抑制劑試劑盒細胞近3000種,來源于美國ATCC,細胞都是經過嚴格質量控制,在中國大陸努力搭建正牌細胞與國內廣大科研人員之間的溝通橋梁。
人β內酰胺酶抑制劑試劑盒
上海乾思生物公司人β內酰胺酶抑制劑試劑盒細胞近3000種,來源于美國ATCC,細胞都是經過嚴格質量控制,在中國大陸努力搭建正牌細胞與國內廣大科研人員之間的溝通橋梁。為您提供外,還有更多相關實驗產品,標準品,細胞株和實驗技術服務等等前期后續服務。選擇正確的實驗試劑或材料是實驗成功的關鍵。
購買上海乾思生物細胞注意事項(乾思生物)發布
一、客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;
收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
二、如為貼壁細胞,請在顯微鏡下觀察細胞密度:
1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作;然后打開蓋子,先把培養基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養16hr(時間根據細胞生長情況調整)之后,傳代或者凍存。
2. 超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。具體步驟如下:
1) 棄去培養液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養瓶中,倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱,然后又將培養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養培養瓶,細胞隨即脫落下來;
3) 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中,按要求分瓶。
三、如為懸浮細胞,吸出培養液,1000轉/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
注意:換液時一半用我們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。
四、細胞出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
(5)視具體情況而定。
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細胞培養技術3個原則:1、用自己的一套試劑,不要和別人混用;2、勤觀察細胞,像養寵物一樣喜愛和關心;3、有規律地換液和傳代,不要“三天打魚,兩天曬網”。
質量可靠,售后有保障
★我庫細胞近3000種,來源于美國ATCC,細胞都是經過嚴格質量控制。
凍存細胞時間為5-7個工作日,活細胞為7-15個工作日。
★由于細胞庫現有細胞類目多,為了不出現混亂錯誤,需要了解相關細胞價格及詳細資料請老師,對您造成的不便還請見諒!
一、細胞的復蘇:
非原代培養的細胞一般凍存于液氮之中,需要培養時要先從液氮中取出使之復蘇。細胞復蘇的原則——快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。
具體操作如下:
1、實驗前準備:
1.1、將水浴鍋預熱至37℃,并將含10%FBS的培養液置于其中預熱;
1.2、用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
1.3、在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等等。
2、取出凍存管及迅速解凍:
2.1、根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
2.2、從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。
2.3、迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化,約1-2min后凍存管內液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內。
3、平衡離心 將細胞懸液吸到離心管中,1000~1500rpm離心3分鐘;
4、制備細胞懸液 吸去上清液,加入10 ml培養液,用吸管輕輕吹打均勻,使細胞懸浮;
5、細胞計數 細胞濃度以5×105/ml為宜。
6、培養細胞
將復合細胞計數要求的細胞懸液吸到培養瓶中,將培養瓶放入37℃和5%CO2的培養箱內培養(略微擰松培養瓶蓋),換液的時間由細胞情況而定。通常,除少數特別注明對DMSO 敏感的細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 可直接放入含有10-15ml(5-10倍)新鮮培養基的培養角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。