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大鼠去甲腎上腺素試劑盒
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大鼠去甲腎上腺素試劑盒細胞培養技術3個原則:1、用自己的一套試劑,不要和別人混用;2、勤觀察細胞,像養寵物一樣喜愛和關心;3、有規律地換液和傳代,不要“三天打魚,兩天曬網”。
大鼠去甲腎上腺素試劑盒質量可靠,售后有保障
★我庫細胞近3000種,來源于美國ATCC,細胞都是經過嚴格質量控制。
凍存細胞時間為5-7個工作日,活細胞為7-15個工作日。
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細胞實驗的基本操作
【細胞培養】
一、細胞的復蘇:
非原代培養的細胞一般凍存于液氮之中,需要培養時要先從液氮中取出使之復蘇。細胞復蘇的原則——快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。
具體操作如下:
1、實驗前準備:
1.1、將水浴鍋預熱至37℃,并將含10%FBS的培養液置于其中預熱;
1.2、用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
1.3、在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等等。
2、取出凍存管及迅速解凍:
2.1、根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
2.2、從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。
2.3、迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化,約1-2min后凍存管內液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內。
3、平衡離心 將細胞懸液吸到離心管中,1000~1500rpm離心3分鐘;
4、制備細胞懸液 吸去上清液,加入10 ml培養液,用吸管輕輕吹打均勻,使細胞懸浮;
5、細胞計數 細胞濃度以5×105/ml為宜。
6、培養細胞
將復合細胞計數要求的細胞懸液吸到培養瓶中,將培養瓶放入37℃和5%CO2的培養箱內培養(略微擰松培養瓶蓋),換液的時間由細胞情況而定。通常,除少數特別注明對DMSO 敏感的細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 可直接放入含有10-15ml(5-10倍)新鮮培養基的培養角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。
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