一背景
奶牛乳房炎是困擾奶牛養殖業三大疾病(乳房炎、子宮炎、肢蹄病)。奶牛乳房炎是由于奶牛乳腺組織受到物理、化學、微生物刺激所發生的一種炎性反應。根據導致奶牛乳房炎病原微生物分離培養方面的資料顯示,引起乳房炎的病原菌主要以金黃色葡萄球菌、鏈球菌、無乳鏈球菌、大腸桿菌為主,占到引起乳房炎病院的90%左右。
奶牛乳房炎至今發病率仍相當高,廣泛存在于世界各地,不僅降低奶牛產奶量和乳品質,給奶牛飼養業造成巨大經濟損失,嚴重威脅奶牛業的發展,而且還影響到乳品食用者的健康。
及時準確地對奶牛乳房炎做出早期診斷,不僅可以保證奶牛的健康,也降低了牛奶的生產成本,避免抗生素濫用所造成的的乳制品安全問題。
如何對奶牛的乳房炎進行檢測和診斷呢?
二牛奶體細胞
體細胞數簡稱為SCC,通常以每毫升牛奶千個細胞來計數。近年來很多國家將體細胞數( SCC ) 作為原料奶收購的標準之一 。影響牛奶體細胞數的因素很多。一般來說,傳染性乳房炎是微生物引起體細胞數增加的主要原因。當乳房外傷或發生疾病產生炎癥時,機體將大量的白細胞分泌進入乳房以清除感染。
牛奶體細胞數不可能為零,但多數牛群可以將牛奶體細胞數控制在15萬以下,這就表明牛群隱性乳房炎發病率很低,乳腺組織損傷小,產奶量高,牛奶質量好。 因此,可以通過檢測乳汁中體細胞的多少來判斷奶牛是否患有乳房炎,尤其對隱性乳房炎的檢測非常實用有效。絕大多數專家、獸醫認為,體細胞數在20萬個/mL以內為正常。
而且隨著牛奶中體細胞數增加,牛奶中不受歡迎的脂肪酶及血纖維蛋白酶含量增加。脂肪酶分解脂肪,產生酸敗氣味,阻止酸奶乳酸菌繁殖,并且減少奶制品存儲時間。血纖維蛋白酶減少牛奶中酪蛋白含量,并且減少干酪產量。即使在冷藏條件下,這些酶仍然發揮作用。體細胞數增加還會使牛奶中的營養成分如乳脂、蛋白質、乳糖明顯下降。
牛奶體細胞數的檢測
(1)基于流式細胞原理的牛奶體細胞快速測定儀(如PerkinElmer公司的CombiScope型體細胞分析儀):其工作原理是利用流式細胞計數(Flowcytometry)技術將被測定的細胞染色并置于懸浮液體之中,然后強迫細胞逐一通過一個非常窄小的縫隙管道。同時,向其發出特殊光束,使得每一個染色后的細胞在通過測定點時也發出回應光束脈沖信號,采用電子技術,再將其脈沖信號記錄下來。利用電腦將所記錄的脈沖信號處理,從而達到對牛奶中細胞自動計數。
Combiscope型體細胞分析儀
(2)CMT試驗:將被檢牛的4個乳區的乳,分別擠在診斷盤的4個小室內,傾斜診斷盤,倒出多余乳,使每個小室內保留乳汁2毫升,分別加入2毫升試劑于小室內,呈同心圓搖動診斷盤,后判定結果。
流式細胞技術(如PerkinElmer公司的CombiScope型體細胞分析儀)和CMT試驗是目前臨床上常用的牛奶體細胞測定方法。流式細胞技術測定的一般是奶牛四個乳頭的混合奶樣,因而不能決定哪一個乳頭感染;CMT試驗操作簡單,價格便宜,能夠快速判斷那個乳頭感染。
三奶牛乳房炎致病因子檢測
引起乳房炎的病原菌有很多種,當知道奶牛患乳房炎后,為了更好的治療,需要及時準確地對奶牛乳房炎致病因子進行檢測。
傳統的細菌生化實驗操作復雜、耗時耗力。因此研發出一種操作簡單、快速省力方法,成為奶牛養殖業的需求,符合當前發展形勢。
良潤生物提供奶牛乳房炎鑒定平板和核酸檢測試劑盒兩種檢測手段。
1奶牛乳房炎鑒定平板
原理
在分離培養基中加入檢測某些菌種的特異性酶底物,該底物為人工合成,由發色基團和微生物可代謝物質組成,通常為無色,但在特異性酶作用下游離出發色基團并顯示一定顏色,直接觀察菌落顏色即可對菌種做出鑒定。
操作步驟
•樣本采集
•平板劃線
•培養判讀
優勢
奶牛乳房炎鑒定平板結果顯示
2核酸檢測試劑盒
原理
實時熒光PCR技術,針對奶牛乳房炎病原菌的特性基因設計引物探針,實現核酸水平上的定性檢測。
操作步驟
•樣本采集
•核酸提取
•上機檢測
優勢
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