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HPLC檢測(cè)阿拉伯糖
阿拉伯糖屬于五碳醛糖,以阿拉伯聚糖、阿拉伯糖基木聚糖、阿拉伯糖基半乳糖體及類似于高等植物半纖維的形式存在。它是一種沒(méi)有熱量的甜料,能抑制水解雙糖的酶,對(duì)蔗糖的代謝轉(zhuǎn)化有阻斷作用,因此,阿拉伯糖具有抑制肥胖、預(yù)防并治療糖尿病方面的功效。
阿拉伯糖本身不存在紫外吸收,迄今為止,有關(guān)阿拉伯糖含量測(cè)定的報(bào)道較少。有學(xué)者運(yùn)用ELSD對(duì)阿拉伯糖樣品成分含量進(jìn)行HPLC分析。本文用天津蘭博液相色譜系統(tǒng)配示差檢測(cè)器對(duì)阿拉伯糖進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果顯示該方法簡(jiǎn)便、快捷、重現(xiàn)性好、靈敏度高。
測(cè)試條件:
儀器
Lanbo 4060液相色譜配示差檢測(cè)器(RI2001);
蘭博AS1000自動(dòng)進(jìn)樣器;
AXM-8 Temp.柱溫箱;
色譜條件:
色譜柱:SMT氨基柱4. 6 mm × 250 mm,5 μm;
流動(dòng)相:80%乙腈水溶液
柱溫:30℃;
進(jìn)樣量:10 ul;
流速:0.8 ml/min。
測(cè)試結(jié)果:
1色譜圖如下:
圖1 阿拉伯糖的HPLC色譜圖
A:阿拉伯糖
2 線性關(guān)系考察 精密稱取阿拉伯糖對(duì)照品約2000 mg,置于100 mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,再精密吸取上述溶液1、2、4、5、10 mL,分別至10 mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,制得標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。取10 μL進(jìn)樣,記錄色譜圖,測(cè)出阿拉伯糖峰面積(見(jiàn)表1)。得線性方程為:y=3663x+5546,R2=0.999。阿拉伯糖在進(jìn)樣量為0.02mg~0.2mg范圍內(nèi),線性關(guān)系良好。
表1 線性試驗(yàn)測(cè)試結(jié)果
序號(hào) | 濃度 | 峰面積 | ||
1 | 2 | 79036 | 78692 | 79213 |
2 | 4 | 156203 | 160246 | 158342 |
3 | 8 | 293654 | 287632 | 290365 |
4 | 10 | 369852 | 375621 | 368536 |
5 | 20 | 741724 | 732658 | 746921 |
3 重現(xiàn)性考察 精密吸取濃度為2 mg/mL、4 mg/mL阿拉伯糖對(duì)照品溶液10 uL,進(jìn)液相色譜儀測(cè)定,重復(fù)進(jìn)樣5次,記錄峰面積,計(jì)算峰面積標(biāo)準(zhǔn)偏差,得到RSD=1.09%。
結(jié)論:
糖類成分多不存在紫外吸收,因此經(jīng)常使用示差檢測(cè)器對(duì)其進(jìn)行分析,但是目前關(guān)于阿拉伯糖采用示差檢測(cè)器分析的報(bào)道較少,阿拉伯糖的測(cè)定則多采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器。本文用液相色譜-蒸發(fā)光閃射檢測(cè)器法測(cè)定阿拉伯糖的含量,進(jìn)行了準(zhǔn)確度、本試驗(yàn)采用天津蘭博液相色譜系統(tǒng)配示差檢測(cè)器對(duì)阿拉伯糖進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果顯示進(jìn)樣量在線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,R2=0.999;重現(xiàn)性也較好,RSD=1.09%。