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柱溫箱分析系統(tǒng)中,對色譜柱溫度控制的要求越來越高,藥典及諸多新的分析方法,也對柱溫給出條件,由于色譜柱恒溫箱可以、穩(wěn)定的控制色譜柱的使用溫度,對于提高色譜柱的柱效,改善色譜峰的分離度,縮短保留時間,降低反壓,保證分析樣品結(jié)果的重復(fù)性,柱溫箱具有不可忽視的作用。使其成為液相色譜儀的重要配套裝置。
在柱溫箱中存在兩相,一相是固定不動的,即固定相;另一相則不斷流過固定相,即流動相。柱溫箱的分離就是溶于流動相中的各組分經(jīng)過固定相時,由于與固定相發(fā)生作用的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出的分離過程來進(jìn)行分離。更詳細(xì)地說就是使用外力使含有樣品的流動相通過與流動相互不相溶的固定相表面。
當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。柱溫箱由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同,隨著流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出,從而實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。
對于流動相溫度的控制目前沒有很好的方法,即使是整個室內(nèi)使用空調(diào)也難于使流動相的溫度保持一致,因此,目前大多采用柱溫箱控制柱溫的方法,使用柱溫箱能耗低,控溫精度高,是液相色譜儀*的輔助設(shè)備。
柱溫箱與流動相的溫度,影響著組分的分離平衡,對于使用柱溫箱的有益之處我們認(rèn)為有以下幾點:
1、柱溫箱可以使保留時間相對恒定,對需要進(jìn)行的定性鑒別可提高其可信度;
2、保留時間相對恒定是進(jìn)行定量的基礎(chǔ),不同的保留時間不僅不能判斷其成份的一致性,同時,由于保留時間不同峰面積也必將發(fā) 生變化,其檢測結(jié)果的可信度將受質(zhì)疑。
3、柱溫箱溫差較大時,因保留時間不穩(wěn)將增加檢測工作的麻煩。
4、溫度低的時候,因流動相黏度增加而使檢測時間延長,柱溫箱同時增加泵的磨損,影響設(shè)備的使用壽命。
5、溫度低的時候還因溶解度相對下降而出現(xiàn)緩沖鹽結(jié)晶而堵塞泵、進(jìn)樣閥、管道、色譜柱的現(xiàn)象。
6、溫度低時還因溶解度下降使雜質(zhì)吸附在填料上而難于洗脫,從而影響色譜柱的使用壽命。