Thermo Scientific直接進(jìn)行PCR的裂解試劑(Lyse and GoPCR Reagent)可以快速釋放細(xì)胞內(nèi)DNA并直接進(jìn)行PCR。使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)可以對DNA序列進(jìn)行快速的分析。該體系即使含有蛋白、RNA以及非特異性DNA等其他的細(xì)胞成分也可進(jìn)行DNA擴(kuò)增反應(yīng)，所以可以不純化DNA而直接在細(xì)菌細(xì)胞裂解液中進(jìn)行DNA擴(kuò)增，擴(kuò)增兼容的試劑僅需要裂解細(xì)胞并釋放模板DNA即可。以往實(shí)驗(yàn)表明利用直接進(jìn)行PCR的裂解試劑(Lyse andGo PCR Reagent)能夠制備直接用于PCR的質(zhì)粒DNA樣本。已經(jīng)驗(yàn)證過，利用該試劑的的配方，體系與幾種可商購的Taq聚合酶兼容。也可以使用該試劑來裂解包括酵母、一些動植物組織、全血以及培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞，制備直接用于PCR的DNA。由于其通用性，直接進(jìn)行PCR的裂解試劑(Lyse and Go PCR Reagent)是分子生物學(xué)研究中一種十分有用的工具。
利用Thermo Scientific直接進(jìn)行PCR的裂解試劑（Lyse and Go PCR Reagent）對大腸桿菌進(jìn)行裂解之后直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增。利用含有或者不含0.8 kb cDNA(大鼠)插入物的pUSE載體分別來轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM-109細(xì)胞，在LB培養(yǎng)平板中37°C培養(yǎng)過夜。用移液器槍頭挑取一部分克隆，加入5μl直接進(jìn)行PCR的裂解試劑(Lyse and Go PCR Reagent)重懸。在加入擴(kuò)增混合物之前將懸浮液加熱到95°C并持續(xù)2分鐘。按照以下程序進(jìn)行PCR反應(yīng)：94°C變性30秒、55°C退火45秒、68°C延伸60秒。同時(shí)，以10納克含有相同插入物的pUSE載體作為正對照。利用1%瓊脂糖凝膠電泳分析擴(kuò)增的產(chǎn)物。泳道M是KiloBase DNA分子標(biāo)記。每個(gè)反應(yīng)進(jìn)行三次重復(fù)。
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