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當前位置:> 供求商機> 人血管生成素1(ANG-1)ELISA科研試劑盒
一、人血管生成素1(ANG-1)ELISA科研試劑盒:試劑盒概述人血管生成素1(Angiopoietin-1, ANG-1)ELISA科研試劑盒是用于檢測人類血清、血漿、細胞培養上清或其他生物樣本中ANG-1含量的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)工具。ANG-1是一種在血管生成、血管成熟和穩定化中發揮關鍵作用的蛋白質,廣泛應用于血管生物學、腫瘤學、心血管疾病、炎癥及其他相關領域的科研。
ELISA試劑盒通過特異性抗體識別并結合樣本中的ANG-1,經過顯色反應,定量檢測ANG-1的濃度。該試劑盒具備操作簡便、特異性強、靈敏度高等優點,適用于實驗室科研使用,幫助研究人員了解ANG-1在生物學過程中的表達水平和功能。
二、人血管生成素1(ANG-1)ELISA科研試劑盒:血管生成素1(ANG-1)背景信息ANG-1是一種關鍵的血管生成因子,通過與Tie2受體結合調控血管的形成和穩定。ANG-1在體內主要由周細胞和成纖維細胞分泌,能夠通過促進內皮細胞之間的粘附和相互作用,抑制血管通透性,維持血管的完整性和功能穩定性。與血管生成素2(ANG-2)共同調控血管生成過程,ANG-1發揮著促進血管成熟的作用,而ANG-2則在血管重構和病理狀態下具有相反的效果。
ANG-1的功能涉及多種生理和病理過程,包括:
血管生成:ANG-1通過激活Tie2受體,促進內皮細胞的存活、遷移和血管內皮的穩定。
血管成熟與穩定化:ANG-1在血管生成的晚期階段起作用,防止血管過度滲漏并增強血管壁的強度。
腫瘤學:ANG-1在腫瘤血管生成和腫瘤進展中起重要作用,是癌癥研究中的熱點之一。
炎癥反應:ANG-1可以通過減少血管通透性和抑制炎性因子的釋放,減少炎癥反應的發生。
三、試劑盒原理人血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法原理,檢測樣本中的ANG-1含量。首先,微孔板預包被有針對ANG-1的特異性抗體,當將樣本加入孔中時,樣本中的ANG-1與抗體結合形成抗原-抗體復合物。經過一系列洗滌步驟后,去除未結合的物質,加入酶標二抗,該二抗同樣與ANG-1結合。最后,通過加入底物顯色反應,形成顏色的深淺與樣本中ANG-1的濃度成正比。反應終止后,用酶標儀在450 nm波長下讀取吸光值,并通過標準曲線計算出樣本中ANG-1的濃度。
四、試劑盒參數
試劑盒名稱:人血管生成素(ANG-1)ELISA科研試劑盒
檢測原理:酶聯免疫吸附試驗(ELISA)—雙抗體夾心法
檢測靶標:血管生成素1(ANG-1)
樣本類型:血清、血漿、細胞培養上清、組織勻漿等生物樣本
檢測范圍:通常為 0.1-100 ng/mL,具體檢測范圍根據試劑盒批次可能有所不同
靈敏度:0.5-1.0 pg/mL,視具體試劑盒版本而定
樣本用量:50-100 µL,每孔
檢測時間:3-5小時,包括加樣、孵育、洗滌、顯色等步驟
重復性:板內和板間的變異系數 (CV%) 一般小于 10%
檢測波長:450 nm(帶 570nm 或 630nm 校正波長)
標準曲線:根據標準品濃度梯度繪制標準曲線,用于定量分析
保存條件:2-8°C保存,避免反復凍融
有效期:6-12 個月,根據具體批次確定
操作步驟:
樣本稀釋后加入微孔板;
孵育后加入酶標二抗;
進行顯色反應,加入終止液;
在酶標儀上測定吸光值。
適用范圍:主要用于科研中的ANG-1含量檢測,包括血管生物學、腫瘤學、心血管疾病及相關領域。
五、試劑盒組成及配件
包被微孔板:預包被有針對ANG-1的特異性抗體。
標準品:ANG-1標準品,提供不同濃度的標準用于繪制標準曲線。
酶標二抗:與ANG-1結合的酶標記抗體,用于檢測抗原-抗體復合物。
洗滌緩沖液:用于清除未結合的抗原、抗體和其他干擾物質。
顯色液:TMB底物,酶催化顯色,用于可視化抗原濃度。
終止液:用于終止顯色反應。
樣品稀釋液:用于稀釋生物樣本,確保樣本濃度在檢測范圍內。
板封膜:用于封閉微孔板,避免樣品和試劑揮發。
使用說明書:詳細的操作流程和注意事項。
六、操作步驟
樣本和標準品準備:按照說明書對樣本進行稀釋,準備好不同濃度的標準品。
加樣:將標準品和樣本分別加入微孔板的相應孔中,每個樣本建議做至少兩個重復孔。
孵育:在溫控環境下孵育,確保抗原與抗體充分結合。
洗板:用洗滌緩沖液多次洗板,去除未結合的抗原、抗體及其他干擾物質。
酶標二抗反應:加入酶標二抗,孵育后重復洗板步驟。
顯色反應:加入顯色液,酶催化底物生成有色產物。
終止反應:加入終止液,固定顏色變化。
數據讀取:用酶標儀在450 nm波長下讀取吸光度,使用標準曲線計算樣本中的ANG-1濃度。
七、試劑盒優勢
高靈敏度:該試劑盒檢測靈敏度高,能夠檢測低至0.5 pg/mL的ANG-1濃度,適合低豐度蛋白檢測。
特異性強:利用雙抗體夾心法,確保對ANG-1的高特異性檢測,避免交叉反應。
操作簡便:操作流程簡單,易于掌握,適合各種規模的實驗室使用。
廣泛適用性:適用于多種生物樣本類型,包括血清、血漿、細胞培養上清等,適應性廣泛。
重復性好:板內和板間變異系數均小于10%,確保實驗結果的準確性和可靠性。
八、應用領域
血管生物學:研究ANG-1在血管生成、血管穩定化中的作用。
腫瘤學:探討ANG-1在腫瘤血管生成和腫瘤進展中的調控作用。
心血管疾病:分析ANG-1在心血管疾病如高血壓、動脈粥樣硬化中的調控作用。
炎癥研究:研究ANG-1在炎癥反應中的作用,特別是在血管通透性調節中的影響。
藥物篩選:用于評估藥物對ANG-1表達和功能的影響,尋找針對血管生成的潛在治療靶點。
九、注意事項
操作前請仔細閱讀說明書,嚴格按照步驟進行。
樣本處理應避免反復凍融,以免影響檢測結果的準確性。
樣本中可能存在影響實驗結果的干擾物,應對樣本進行適當稀釋或預處理。
試劑盒為一次性使用,試劑不能混用或重復使用。
實驗中應避免交叉污染,尤其在加樣和洗板步驟時要格外小心。
十、總結人血管生成素(ANG-1)ELISA科研試劑盒是一款高效、精準的工具,適用于檢測血清、血漿等樣本中的ANG-1濃度,廣泛應用于血管生成、腫瘤學、炎癥及心血管疾病研究。該試劑盒靈敏度高、特異性強,為科研人員提供了可靠的ANG-1定量檢測方法,有助于推動相關領域的基礎研究和臨床應用開發。
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