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人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA科研試劑盒
人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA科研試劑盒

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更新時(shí)間:2024/8/21 10:33:19

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人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA科研試劑盒操作簡(jiǎn)便,靈敏度高,能夠廣泛應(yīng)用于心血管、腎臟病、高血壓等領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究中


詳細(xì)介紹

人血管緊張素Ⅱ(Angiotensin II, ANG-Ⅱ)ELISA科研試劑盒是一款專門用于檢測(cè)人類血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等生物樣本中血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)水平的工具。ANG-Ⅱ是腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAAS)中的一種關(guān)鍵肽類激素,主要參與血壓調(diào)節(jié)、體液平衡和血管的生理功能調(diào)控。本試劑盒通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法,具有高靈敏度和高特異性,適合用于科研領(lǐng)域,幫助科研人員定量測(cè)定ANG-Ⅱ的含量,并研究其在多種生理病理過程中的作用。

二、血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)背景信息

ANG-Ⅱ是RAAS系統(tǒng)中的一種主要效應(yīng)因子,通過與血管緊張素Ⅱ受體(AT1和AT2)結(jié)合,發(fā)揮以下生理和病理功能:

  1. 血管收縮:ANG-Ⅱ具有強(qiáng)大的血管收縮作用,增加外周血管阻力,從而提高血壓。

  2. 水鹽平衡調(diào)節(jié):ANG-Ⅱ刺激醛固酮分泌,促進(jìn)腎臟對(duì)鈉和水的重吸收,調(diào)節(jié)體液和電解質(zhì)平衡。

  3. 心血管重塑:ANG-Ⅱ參與心血管系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)性重塑,過度的ANG-Ⅱ水平與高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化和心力衰竭等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。

  4. 炎癥反應(yīng):ANG-Ⅱ還可以通過誘導(dǎo)炎癥因子的表達(dá),參與炎癥反應(yīng)和纖維化過程。

由于ANG-Ⅱ在多種疾病,如高血壓、慢性腎病、心血管疾病和代謝紊亂中的關(guān)鍵作用,檢測(cè)其濃度對(duì)于這些疾病的基礎(chǔ)研究和治療探索具有重要意義。

三、試劑盒原理

人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)的雙抗體夾心法或競(jìng)爭(zhēng)法原理,具體操作取決于說明書的詳細(xì)要求。試劑盒中微孔板已包被有針對(duì)ANG-Ⅱ的特異性抗體,樣本中的ANG-Ⅱ與之結(jié)合形成抗原-抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌步驟后,加入酶標(biāo)記的二抗,二抗通過與抗原結(jié)合發(fā)揮作用,最終通過加入底物顯色反應(yīng)并在酶標(biāo)儀中讀取450 nm的吸光度值。樣本中的ANG-Ⅱ濃度通過標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析。

四、試劑盒參數(shù)

  1. 試劑盒名稱:人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA科研試劑盒

  2. 檢測(cè)原理:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)—雙抗體夾心法或競(jìng)爭(zhēng)法

  3. 檢測(cè)靶標(biāo):血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)

  4. 樣本類型:血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等生物樣本

  5. 檢測(cè)范圍:一般為 0.1-1000 pg/mL,具體檢測(cè)范圍以批次說明書為準(zhǔn)

  6. 靈敏度:通常為 1 pg/mL或更高,視具體試劑盒版本而定

  7. 樣本用量:50-100 µL,每孔

  8. 檢測(cè)時(shí)間:3-5小時(shí),具體根據(jù)操作步驟

  9. 重復(fù)性:板內(nèi)和板間變異系數(shù)(CV%)通常小于10%

  10. 檢測(cè)波長(zhǎng):450 nm(帶570nm或630nm校正波長(zhǎng))

  11. 標(biāo)準(zhǔn)曲線:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,用于定量分析樣本中的ANG-Ⅱ濃度

  12. 保存條件:2-8°C保存,避免反復(fù)凍融

  13. 有效期:6-12個(gè)月,具體批次以說明書為準(zhǔn)

  14. 操作步驟:樣品加樣、抗原-抗體反應(yīng)、洗滌、加酶標(biāo)抗體、顯色、終止反應(yīng)、讀數(shù)

  15. 適用范圍:用于科研中的ANG-Ⅱ含量檢測(cè),廣泛應(yīng)用于心血管疾病、腎臟病、高血壓等疾病研究

五、試劑盒組成

  1. 包被微孔板:預(yù)包被有針對(duì)ANG-Ⅱ的特異性抗體,用于捕獲ANG-Ⅱ。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)品:ANG-Ⅱ標(biāo)準(zhǔn)品,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,定量分析樣本中的ANG-Ⅱ。

  3. 酶標(biāo)二抗:特異性結(jié)合ANG-Ⅱ的酶標(biāo)抗體,幫助進(jìn)行檢測(cè)。

  4. 洗滌液:用于洗滌微孔板,去除未結(jié)合的成分,減少背景噪音。

  5. 顯色液:TMB底物,經(jīng)過酶反應(yīng)產(chǎn)生可檢測(cè)的顏色變化。

  6. 終止液:用于終止顯色反應(yīng),確保結(jié)果穩(wěn)定可測(cè)。

  7. 樣品稀釋液:用于稀釋生物樣本,確保濃度在檢測(cè)范圍內(nèi)。

  8. 說明書:提供詳細(xì)操作步驟和注意事項(xiàng)。

六、操作步驟

  1. 樣品與標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:根據(jù)說明書對(duì)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行適當(dāng)稀釋,準(zhǔn)備好各個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品。

  2. 加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本加入到包被的微孔板中,每個(gè)樣本應(yīng)至少做兩次重復(fù)。

  3. 孵育:在溫度條件下孵育,確保抗原與抗體充分結(jié)合。

  4. 洗板:用洗滌液多次洗板,清除未結(jié)合的抗體、抗原等干擾物質(zhì)。

  5. 加酶標(biāo)二抗:加入酶標(biāo)二抗后,孵育并再次洗板。

  6. 顯色反應(yīng):加入顯色底物,發(fā)生酶促反應(yīng),生成有色產(chǎn)物。

  7. 終止反應(yīng):加入終止液,固定顏色變化。

  8. 讀數(shù):用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下讀取吸光度值,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本中的ANG-Ⅱ濃度。

七、試劑盒優(yōu)勢(shì)

  1. 高靈敏度:試劑盒可檢測(cè)低至1 pg/mL的ANG-Ⅱ濃度,適用于低豐度樣本的檢測(cè)。

  2. 特異性強(qiáng):使用雙抗體夾心法,確保對(duì)ANG-Ⅱ的高特異性檢測(cè),避免交叉反應(yīng)。

  3. 操作簡(jiǎn)便:步驟簡(jiǎn)單,適合各類實(shí)驗(yàn)室操作,節(jié)省時(shí)間。

  4. 重復(fù)性好:板內(nèi)和板間的變異系數(shù)均小于10%,確保結(jié)果的精確性和一致性。

  5. 適用范圍廣:適用于多種樣本類型,包括血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,應(yīng)用廣泛。

八、應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 心血管研究:用于檢測(cè)ANG-Ⅱ在高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病中的作用。

  2. 腎臟病研究:評(píng)估ANG-Ⅱ在腎功能失調(diào)中的表現(xiàn),如慢性腎病和腎小球疾病。

  3. 內(nèi)分泌學(xué)研究:研究ANG-Ⅱ在體液平衡和血壓調(diào)節(jié)中的重要作用。

  4. 炎癥與纖維化:ANG-Ⅱ在炎癥反應(yīng)和組織纖維化中的作用研究,為治療相關(guān)疾病提供依據(jù)。

  5. 藥物篩選:用于檢測(cè)藥物對(duì)ANG-Ⅱ水平的影響,特別是在抗高血壓藥物的研究中。

九、注意事項(xiàng)

  1. 試劑盒在操作前應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照步驟進(jìn)行操作。

  2. 樣本在使用前應(yīng)避免反復(fù)凍融,確保樣本質(zhì)量穩(wěn)定。

  3. 在實(shí)驗(yàn)過程中,需防止樣本交叉污染,尤其在加樣和洗板過程中要特別注意。

  4. 試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷。

  5. 實(shí)驗(yàn)中不同批次試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)品不可混用,以確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

十、總結(jié)

人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA科研試劑盒是一種高效、可靠的檢測(cè)工具,適用于研究血壓調(diào)節(jié)、體液平衡及與血管功能相關(guān)的各種生理病理過程。該試劑盒操作簡(jiǎn)便,靈敏度高,能夠廣泛應(yīng)用于心血管、腎臟病、高血壓等領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究中。通過定量檢測(cè)ANG-Ⅱ水平,科研人員能夠深入了解其在疾病中的作用,進(jìn)而為相關(guān)疾病的治療提供新的思路和策略。

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