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人紅細胞生成素(Erythropoietin, EPO)ELISA科研試劑盒是一款專門用于定量檢測血清、血漿、細胞培養上清等生物樣本中EPO含量的工具。EPO是一種糖蛋白激素,主要由腎臟分泌,作用于骨髓中的造血細胞,促進紅細胞生成。它在調節紅細胞生成、維持氧供平衡及治療貧血等方面具有重要作用。該試劑盒采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)技術,具備高靈敏度和特異性,適用于血液學、腎臟疾病、運動生理學等相關領域的研究。
二、人紅細胞生成素(EPO)ELISA科研試劑盒:背景信息
EPO是一種重要的調控紅細胞生成的激素,其主要功能包括:
紅細胞生成調控:EPO通過作用于骨髓中的紅細胞前體,刺激其增殖和分化,最終促進紅細胞生成,維持血液中的紅細胞數量。
氧供調節:當機體處于缺氧狀態時,腎臟中的EPO生成增加,促進紅細胞生成,從而提高血液的攜氧能力。
治療貧血:EPO在醫學上常用于治療因慢性腎病、癌癥或其他原因導致的貧血。
運動與代謝調節:在運動生理學中,EPO是提高運動員耐力的重要因素,常用于研究訓練與適應過程中的紅細胞生成調節機制。
EPO水平的檢測在血液學、腎臟病學、運動生理學及相關疾病研究中具有重要意義。
三、人紅細胞生成素(EPO)ELISA科研試劑盒:原理
人紅細胞生成素(EPO)ELISA科研試劑盒采用雙抗體夾心法進行檢測。微孔板中預包被有特異性抗EPO的抗體,加入樣本后,樣本中的EPO與捕獲抗體結合。經過洗滌后,加入酶標二抗,該二抗與EPO結合,形成夾心結構。隨后通過顯色反應,顏色的深淺與樣本中的EPO濃度成正比。最終在酶標儀上讀取450 nm的吸光度,并通過標準曲線定量計算樣本中的EPO濃度。
四、試劑盒參數
試劑盒名稱:人紅細胞生成素(EPO)ELISA科研試劑盒
檢測原理:酶聯免疫吸附試驗(ELISA)—雙抗體夾心法
檢測靶標:紅細胞生成素(EPO)
樣本類型:血清、血漿、細胞培養上清等生物樣本
檢測范圍:通常為 0.1-1000 mIU/mL,具體范圍依批次而定
靈敏度:一般為 0.5-1.0 mIU/mL,視具體批次說明書而定
樣本用量:50-100 µL,每孔
檢測時間:3-5小時,視具體步驟而定
重復性:板內和板間變異系數(CV%)通常小于10%
檢測波長:450 nm(帶570 nm或630 nm校正波長)
標準曲線:通過標準品繪制標準曲線,用于定量分析
保存條件:2-8°C保存,避免反復凍融
有效期:6-12個月,具體以批次說明書為準
操作步驟:樣本加樣、抗原-抗體結合、洗滌、加酶標抗體、顯色反應、終止反應、讀數
適用范圍:用于科研中EPO含量檢測,廣泛應用于血液學、腎臟病學、運動生理學等領域
五、試劑盒組成
包被微孔板:預包被有特異性抗EPO的抗體,用于捕獲樣本中的EPO。
標準品:提供不同濃度的EPO標準品,用于繪制標準曲線。
酶標二抗:與EPO結合的酶標抗體,用于檢測抗原-抗體復合物。
洗滌液:用于清洗微孔板,去除未結合的物質,降低背景噪音。
顯色底物:TMB底物,通過酶促反應生成顏色。
終止液:用于終止顯色反應,確保顏色穩定。
樣品稀釋液:用于樣本稀釋,確保濃度在檢測范圍內。
板封膜:用于在孵育期間封閉微孔板,避免樣品和試劑蒸發。
使用說明書:提供詳細操作步驟和注意事項。
六、操作步驟
樣本與標準品準備:按照說明書對樣本進行稀釋,準備不同濃度的標準品。
加樣:將樣本和標準品加入到預包被的微孔板中,每個樣本建議做重復測試。
孵育:在適當溫度下孵育,確保EPO與捕獲抗體結合。
洗板:用洗滌液清洗微孔板,去除未結合的抗原和抗體。
加酶標二抗:加入酶標二抗,孵育后再次洗板。
顯色反應:加入TMB顯色底物,反應后生成有色產物。
終止反應:加入終止液,固定顏色變化。
讀數:使用酶標儀在450 nm波長下讀取吸光度,計算樣本中的EPO濃度。
七、試劑盒優勢
高靈敏度:本試劑盒可檢測低至0.5 mIU/mL的EPO,適合低豐度樣本的檢測。
特異性強:雙抗體夾心法確保了對EPO的高度特異性檢測,避免交叉反應。
操作簡便:操作流程簡潔易行,適合各類實驗室使用。
重復性好:板內和板間的變異系數均低于10%,保證了實驗結果的精確性和一致性。
廣泛應用性:適用于多種樣本類型,包括血清、血漿和細胞培養上清,應用廣泛。
八、應用領域
血液學研究:EPO在紅細胞生成調節及貧血治療中的應用研究。
腎臟疾病研究:研究EPO在腎臟疾病患者中的表達水平,評估腎功能衰退與貧血的關系。
運動生理學:EPO在高原適應和運動員耐力提升中的作用,研究其在運動生物學中的調節機制。
腫瘤學研究:EPO在癌癥相關貧血治療及腫瘤生長中的作用。
藥物篩選:評估不同藥物對EPO表達及其生理功能的影響。
九、注意事項
試劑盒操作前應仔細閱讀說明書,嚴格按照步驟進行操作。
樣本在檢測前應避免反復凍融,以確保樣本質量穩定。
實驗過程中應避免樣本交叉污染,特別是在加樣和洗板時應格外注意。
試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷。
試劑盒中各組分不可與其他批次產品混用,以確保實驗的準確性。
十、總結
人紅細胞生成素(EPO)ELISA科研試劑盒是一款高效、靈敏的工具,適用于科研中對EPO水平的定量分析。通過檢測樣本中的EPO含量,科研人員可以深入了解其在紅細胞生成、氧供調節及相關疾病中的作用,廣泛應用于血液學、腎臟病學、運動生理學及其他相關研究領域。
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