用恒溫培養箱監控細胞培養中的污染
大家都了解,細胞培養過程中難免會出現污染,小喆講解一下細胞污染如何鑒定。
細胞培養是生物醫學研究的常見操作,其中避免細菌污染是重要一環。細胞是否干凈,直接關系到實驗結果穩定性的好壞。
一般情況下細胞實驗過程中出現的常見污染主要有:細菌污染、真菌污染和支原體污染。每種情況又分別有不同的癥狀和解決方法。
我們將分三篇文章,簡要概述三種不同污染的癥狀及處理方法。
細菌概述
細菌是一種原核細胞微生物,一般為微米級別。細胞培養過程中常見的污染菌為大腸桿菌、葡萄球菌
細菌污染癥狀
與其他污染相比,細菌污染在細胞培養過程中“發病"更為迅速,較容易被發現。具體表現為:
細胞培養基短期內變黃且渾濁(大量酸性物質累積)
靜置的培養液時不渾濁,但稍加震蕩,就有許多渾濁物漂起
可見培養液中有大量圓球狀顆粒物漂浮
細胞停止生長并有中毒表現,后出現大量死亡
細菌污染鑒定
簡易方法:
1、取少量培養液涂片染色檢查,憑經驗判斷細菌種類。
2、向肉湯培養基內滴入少量培養液
細菌污染的祛除
對于一般細胞:發生污染直接丟棄,并對環境進行消殺,紫外線滅菌、消毒液擦拭電熱恒溫培養箱、工作臺等。
對于重要且污染相對較輕的細胞:一般用抗生素的常用量的 5~10 倍作沖擊療法,用藥 24~48 小時后再換常規培養液,需要注意的是:
一旦發生污染后再使用抗生素常常難以祛除,有的抗生素只有抑菌作用而無殺菌效應。
且有研究表明,大量使用抗生素,或對細胞基因組產生影響。