用電熱恒溫培養箱對志賀氏菌進行操作
志賀氏菌顯色培養基在微生物檢測中常用于用于志賀氏菌的選擇性分離和初步鑒別。
培養基原理:蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;抑制劑抑制雜菌的生長;酚紅是pH指示劑,發酵糖產酸的菌呈黃色;混合色素對應的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團。
志賀氏菌顯色培養基配方(每升):
蛋白胨 9 g
酵母膏粉 3 g
氯化鈉 5 g
糖類 15 g
瓊脂 15 g
酚紅 0.1g
混合色素 2.1g
抑制劑 2 g
添加劑 10 g
終pH 6.8±0.2
使用方法:
1、稱取51.2 g志賀氏菌顯色培養基,加入970 mL蒸餾水或去離子水(可按比例擴大增或縮小),攪拌加熱煮沸至*溶解(避免過度加熱),無需高壓滅菌,冷至50~55℃左右備用;
2、用30 mL蒸餾水或去離子水溶解1瓶添加劑(SR0440),充分混勻直至溶液變成淡黃色,使用0.45 μm或0.22 μm的濾膜過濾除菌,無菌操作加入到已冷卻至50~55℃的970 mL培養基基礎中(可按比例擴大或縮小),充分混勻后傾注平板備用;
3、待檢樣品按照相應的標準(GB、SN、FDA等)進行取樣及前增菌,挑取一環增菌液劃線接種于制備好的該培養基上,于電熱恒溫培養箱36±1℃培養20~24 h,觀察結果,挑取典型或可疑志賀氏菌單菌落進行生化驗證試驗。
質量控制:本品傾注平板后呈橙紅色,下列菌株接種后于36±1℃培養20~24 h生長情況如下表:
培養基貯 存:貯存于2~8℃、避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。
規 格:可配置1000 mL的培養基干粉。