山藥多糖的提取工藝
山藥是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食同源食物之一。主產(chǎn)于河南,湖南、湖北、江西等省區(qū)亦產(chǎn)。以焦作一帶出產(chǎn)的山藥品質(zhì)優(yōu)好、藥效高,又稱(chēng)懷山藥。表面黃白色或淡黃色,有縱皺紋及須根痕。去皮者稱(chēng)“光山藥”,表面白色,光滑細(xì)膩,有微細(xì)維管束線(xiàn)紋。質(zhì)堅(jiān)實(shí),斷面白色,粉質(zhì)。味微酸,帶黏性。本品性平,味甘。用于治療脾虛食少、久瀉不止、慢性腸炎、肺虛喘咳、腎虛遺精、慢性腎炎、尿病、遺尿、白帶等病癥。山藥主要含有蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、維生素、脂肪、膽堿和淀粉酶等成分,并含有碘、鈣、鐵和磷等人體*的微量元素,具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及藥用價(jià)值。
山藥多糖提取工藝具體實(shí)驗(yàn)所需的儀器設(shè)備:電子分析天平、鼓風(fēng)干燥箱、循環(huán)水泵、微型砂芯漏斗。
所需藥品:1mg·ml-1葡萄糖對(duì)照品:苯酚、濃硫酸、葡萄糖、乙醇試劑;
實(shí)驗(yàn)用水:為去離子水,材料為新鮮懷山藥。
實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟
1;懷山藥的預(yù)處理
將新鮮懷山藥少量置于鼓風(fēng)干燥箱中55℃烘干24h。將干燥的懷山藥粉碎,備用。
2;懷山藥多糖的提取將制備好的懷山藥干粉取0.1g懷山藥干粉置于具塞三角瓶中,加入2ml蒸餾水75℃熱水中提取2小時(shí)。減壓抽濾。,浸提完畢后取出冷卻,4000r/min,離心10min,分離上清液與沉淀物。上清液濃縮冷卻,加入4倍體積無(wú)水乙醇,靜置12h,收集沉淀后干燥得淡黃色固體,用蒸餾水溶解,加入0.05mol/L的MgC12溶液和無(wú)水乙醇沉淀。離心取上清液,減壓濃縮至少許,干燥得懷山藥粗多糖,粗多糖提取率為0.624%。
3;大吸收波長(zhǎng)的確定取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液和粗多糖溶液各2.5ml,加入5%的苯酚1mL和濃硫酸6mL,混合均勻后,顯色30min,空白對(duì)照以去離子水代替,在400-600nm波長(zhǎng)范圍掃描,選取吸收波長(zhǎng)488nm為測(cè)定波長(zhǎng)。
4;標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制做將配置好的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,精密吸取葡萄糖對(duì)照品溶液0.3ml,
0.4ml,0.6ml,0.9ml,1.2ml,1.5ml置于15mL具塞刻度試管中,分別加入蒸餾水至體積為2mL,
加入1mL苯酚和6mL硫酸,混合均勻后,顯色30min,在大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,空白對(duì)照以重蒸水代替糖溶液。以糖濃度(C)為橫坐標(biāo),吸光度(A)為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。結(jié)果:回歸方程為Y=0.01398X-0.00669,R=0.9998(n=6),線(xiàn)性范圍0-78.8µg/ml。