目錄:柏萊源(天津)生物科技有限公司>>生物試劑>>PCR>> SF2131.1×S4 Fidelity PCR Mix(dye-)
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 5× 1.125 mL |
---|---|---|---|
應用領域 | 生物產業 |
產品特點
? 操作簡單:1.1×即用型預混液,無需添加ddH2O,大程度地減少實驗步驟;
? 高保真:保真度為野生型Taq酶的30倍;
? 極快的延伸速度:10~15 s/kb;
? 超高的耐熱性能:98℃熱處理1 h后聚合酶活性無明顯變化。
產品簡介
1.1×S4 Fidelity PCR Mix(dye-)為1.1×即用型快速PCR預混液,內含S4 Fidelity DNA polymerase、dNTPs以及優化的緩沖體系,只需添加引物和模板即可進行擴增,可有效擴增5 kb以內的DNA片段。
該酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性,擴增產物為平末端,可直接用于平末端克隆。
產品組成
組分 | 規格 |
1.1×S4 Fidelity PCR Mix(dye-) | 5×1.125 mL |
保存條件
-20℃保存 24 個月
適用范圍
本產品適用于以試劑盒提取的基因組 DNA、cDNA 和質粒 DNA 的 PCR 擴增,如基因鑒定、基因克隆等實驗。
注意事項
本產品為 1.1×PCR 預混液,無需額外添加 ddH2O。每次反應中該產品用量至少應占到總反應體積的 85%,50 μL 體系至少使用 43 μL PCR Mix,25 μL 至少使用 21 μL PCR Mix;
請使用高質量的模板進行擴增,如試劑盒提取的基因組 DNA。請勿使用 dUTP 或含U嘧啶的引物與模板;
3. PCR Mix 應避免反復凍融,短期內多次使用可置于 4℃保存。
常見問題與解決辦法
Q1:擴增無產物或產物量少?
A1:
1) 模板降解或模板純度差。電泳檢測模板質量,使用高質量模板;
2) 模板濃度過低。適當增加模板用量;
3) 引物不合適。優化引物設計;
4) 退火溫度不合適。設置退火溫度梯度,摸索合適的退火溫度;
5) 循環數過少。適當增加 5~10 個循環;
6) 延伸時間不足。復雜模板可適當增加延伸速度至 20~30 s/kb。
Q2:擴增出現非特異條帶或彌散帶?
A2:
1) 引物特異性差。優化引物,避免非特異性條帶以及引物二聚體的擴增;
2) 引物濃度過高。降低引物濃度;
3) 模板過量或純度差。減少模板量,使用高質量模板;
4) 退火溫度過低。適當提高退火溫度或使用 Touchdown PCR 程序;
5) 循環數過多。減少循環數至 25~30 cycles。