磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)是一種緩沖溶液,通常用于免疫組織化學(IHC)染色,并且經常用于生物學研究中。 PBS是一種水性鹽溶液,包含磷酸氫鈉,氯化鈉,在某些情況下還包含氯化鉀和磷酸二氫鉀。
如何制作PBS緩沖液?
稱重10.9g無水磷酸氫二鈉(Na2HPO4),3.2g無水磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和90g氯化鈉(NaCl)。溶于1L蒸餾水。
將pH調節至7.4,使溶液的終體積達到1L。
使用前將其稀釋10倍,必要時重新調節pH值。
通過向1L溶液中加入5mL Tween 20,可以制成含0.5%Tween 20的PBS溶液。
制作PBS緩沖液的技巧
配制PBS溶液后,將緩沖液保存在室溫下。
非無水試劑可以代替,但您必須重新計算每種試劑的適當質量,以容納添加的水分子。
PBS緩沖液的用途:
磷酸鹽緩沖鹽水具有許多用途,因為它對大多數細胞均等滲且無毒。它可以用于稀釋物質,通常用于沖洗細胞容器。 PBS可以在各種方法中用作稀釋劑來干燥生物分子,因為其中的水分子將圍繞物質(例如蛋白質)結構化。將其“干燥”并固定在固體表面上。
pH值保持穩定且一致,以防止細胞破壞。
與該物質結合的水薄膜可防止變性或其他構象變化。碳酸鹽緩沖液可用于相同目的,但效果較差。
在橢圓偏光法中測量蛋白質吸附時,PBS也可用于獲取參考光譜。