DMEM培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時(shí)又分為DMEM高糖培養(yǎng)基(低于4500mg/L)和DMEM低糖培養(yǎng)基(低于1000mg/L)。高糖型有利于細(xì)胞停泊于一個(gè)位置生長,適于生長較快、附著較困難腫瘤細(xì)胞等。
特點(diǎn):
1.氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;
2.維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍;
3.含有糖酵解途徑中的重要物質(zhì)--丙酮酸;
4.含有微量的鐵離子。
DMEM高糖培養(yǎng)基與DMEM低糖培養(yǎng)基的區(qū)別
1、用途不同:低糖DMEM用于養(yǎng)干細(xì)胞可防分化,高糖DMEM可以養(yǎng)大多數(shù)哺乳動(dòng)物的細(xì)胞。
2、適用性不同:高糖DMEM 適于培養(yǎng)代謝旺盛的細(xì)胞,而低糖適于培養(yǎng)一般代謝水平的細(xì)胞。代謝活躍的細(xì)胞,如ES,低糖培養(yǎng)基不能提供足夠的碳源。
3、性質(zhì)不同:低糖的酵母適合在7%以下的糖濃度中生存,而高糖的酵母適合在7%以上糖濃度中生存。
4、做單抗細(xì)胞融合時(shí),一般使用低糖,高糖使細(xì)胞生長過快,不利于融合細(xì)胞的染色體穩(wěn)定。細(xì)胞穩(wěn)定培養(yǎng)10代以上,就可以使用高糖DMEM進(jìn)行培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
所有的液體及干粉培養(yǎng)基應(yīng)在2~8℃避光保存,并在有效期內(nèi)使用。
不建議配制培養(yǎng)基濃縮液,部分氨基酸或鹽會(huì)在高濃度下不溶解或沉淀。
液體培養(yǎng)基的pH 儲(chǔ)存時(shí)會(huì)因?yàn)槎趸嫉奶右荻l(fā)生改變,建議盡量減少開瓶次數(shù)。
滅菌后的液體培養(yǎng)基添加物應(yīng)無菌并在無菌操作下添加。
干粉培養(yǎng)基吸濕性強(qiáng),極易吸水變質(zhì)。粉包打開后應(yīng)全部使用或剩余舍棄。