外泌體特指直徑在30-100nm的盤狀囊泡,其內部包裹了多種蛋白質、mRNA、non-coding RNA等分子。外泌體主要來源于細胞內多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。無外泌體血由細胞分泌釋放后,通過個種體液在體內傳播,被靶細胞攝入后,釋放內部的生物分子,參與細胞間的通訊,調節細胞功能。
就目前而言幾乎所有類型的細胞都可以產生并釋放外泌體,不同的生物體液(血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、腹水)中都發現有大量外泌體存在,外泌體由細胞分泌釋放后,通過個種體液在體內傳播,被靶細胞攝入后,釋放內部的生物分子,參與細胞間的通訊,調節細胞功能。
無外泌體血清滅活工藝流程:
1.選用與血清瓶同規格的對照瓶一個
2.對照瓶內放入與血清等體積的水
3.溫度預試:對照瓶內插入2—3支經挑選的溫度計(保證測試溫度的準確性),放入水浴箱中,接通電源,調節溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
4.無外泌體血清滅活血清瓶與帶溫度計的對照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計所示溫度上升至56℃時,定時30分鐘。
5.大瓶無外泌體血清滅活后,進行分裝
6.保存:分裝后,無外泌體血清抽樣做無菌試驗,-20~-70℃保存。
無外泌體血清的熱滅活是很多培養者感興趣的話題,價格不菲的無外泌體血清中含有諸如生長因子,維生素,氨基酸等珍貴物質,而將它們置于50℃以上的溫度長達30分鐘是*沒有必要的。