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120次Sulfo-Cy3 maleimide,水溶CY3-馬來酰亞胺
外觀 : | 紅色粉末 |
CAS號 : | 1656990-68-9 |
分子式 : | C36H41KN4O9S2 |
分子量 : | 776.96 |
ex/em : | 550/566 nm (PBS緩沖液) |
消光系數(shù)(ε) : | 162000 L?mol?1?cm?1 |
量子產(chǎn)率(Φ) : | 0.1 |
溶解性 : | 易溶于甲醇,DMF等有機(jī)溶劑,*易溶于水 |
保存條件 : | 避光,干燥,-20oC保存 |
運(yùn)輸條件 : | 室溫 |
結(jié)構(gòu)式:
磺化Cy3是Cy3(Cyanine 3)的水溶型。它的光譜性質(zhì)和Cy3類似,在熒光顯微鏡下發(fā)橘黃色熒光。它的熒光很亮,并且對pH不敏感,一般可以用530nm-561nm的激光束激發(fā)然后用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。標(biāo)記后,樣品背景熒光一般認(rèn)為比TAMRA等系列的染料低。 磺化Cy3可以用來標(biāo)記蛋白,抗體,多肽,核酸等各種生物分子。
馬來酰亞胺(maleimide)是生物標(biāo)記反應(yīng)中常用的基團(tuán),它可以和巰基(-SH)通過親和加成反應(yīng)生成穩(wěn)定的巰醚(thioester)結(jié)構(gòu)從而實現(xiàn)標(biāo)記。盡管胺基(比如賴氨酸精氨酸側(cè)鏈)也有親和性,但在中性或微酸性緩沖液中,馬來酰亞胺選擇性標(biāo)記巰基(反應(yīng)速度比胺基快>1000倍)。標(biāo)記反應(yīng)反應(yīng)迅速,選擇性高,產(chǎn)率好,另外,巰基是一種在生物分子中廣泛存在的官能團(tuán),比如蛋白中的半胱氨酸(cysteine)和雙硫鍵等,因此馬來酰亞胺/巰基(maleimide/thiol)標(biāo)記已成為僅次于NHS/胺基標(biāo)記的常用生物連接反應(yīng)(bioconjugation)。
磺化Cy3-馬來酰亞胺的水溶性*高,所以在標(biāo)記反應(yīng)中不需要使用有機(jī)共溶劑,特別適合標(biāo)記對有機(jī)溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性*好,并且染料分子本身帶電荷,標(biāo)記到生物分子表面后不會引發(fā)疏水性聚集,提高熒光標(biāo)記產(chǎn)物的穩(wěn)定性。磺化Cy3-馬來酰亞胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有機(jī)溶劑,標(biāo)記反應(yīng)也可以在純有機(jī)溶劑中進(jìn)行
磺化Cy3-馬來酰亞胺標(biāo)記后的產(chǎn)物Ex/Em是550/566nm。
· 磺化Cy3水溶性高,*性強(qiáng),如需脂溶性標(biāo)記染料,請選擇普通Cy3-馬來酰亞胺。
· 天然生物分子中巰基一般于氧化狀態(tài)(如雙硫鍵)存在,在馬來酰亞胺標(biāo)記前,務(wù)還原劑(如DTT,TCEP)活化巰基并除去多余還原劑。
· 馬來酰亞胺也可以和疊氮化合物反應(yīng),應(yīng)避免疊氮官能團(tuán)。
· 標(biāo)記反應(yīng)不要放在強(qiáng)光下,因為大部分熒光化合物在強(qiáng)光下長時間照射會緩慢光漂泊(photobleaching)。
熒光光譜:
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