供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1 kit |
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貨號 | CS-20001-100 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥,綜合 |
產品簡介
詳細介紹
小鼠穩態樹突狀細胞培養試劑盒是為在體外培養和誘導小鼠造血前體細胞向成熟樹突狀細胞(DC)亞群分化發育而專門設計的一款含血清培養基套裝。該培養試劑盒可在10天內同時誘導不同DC亞群產生,主要包括傳統型cDC2(CD11c+ MHCII+ CD11b+B220-)和漿細胞樣pDC(CD11cmod MHCIIlow B220+PDCA1+),是研究不同亞群DC分化發育和功能、以及產生小鼠DC疫苗的重要培養系統。
產品特點
針對培養小鼠成熟樹突狀細胞而設計
產品成分
產品名稱 | Cat log # | 規格 | 儲存條件 |
小鼠穩態樹突狀細胞培養試劑盒 | CS-20001-100 | 1 kit | |
小鼠穩態樹突狀細胞基礎培養基 | CS-20001-B | 100ml | 4℃ |
小鼠穩態樹突狀細胞補充因子 | CS-20001-S | 1ml | -20℃ |
預篩選樹突狀細胞專用胎牛血清 | CS-DCF-10 | 10ml | -20℃ |
*培養基配制
(在無菌生物安全柜中,開展以下操作)
1.在4℃冰箱解凍補充因子和胎牛血清,混勻后使用。
注:解凍后的補充因子和血清可放置于4℃冰箱,在1個月內使用;或者分裝至合適體積后,保存于-20℃冰箱,不可反復凍融!2.將1體積的補充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎培養基中,充分混勻,得到小鼠穩態樹突狀細胞*培養基。如取100ul補充因子和1ml血清加入至8.9ml基礎培養基,以此類推。
注:配好的*培養基請于4℃保存,且于1個月內使用完畢。使用說明
(請詳細閱讀使用說明后再開始相關實驗)
1.使用淋巴細胞分離液從小鼠骨髓總細胞中分離得到骨髓單個核細胞(BM-MNC),計數。
2.D0:使用*培養基重懸BM-MNC,調整細胞密度至1.5*10^6/ml,按照如下表格所示將細胞鋪于培養板:
培養板 | *培養基體積 | BM-MNC細胞數/孔 |
24孔板 | 1ml | 1.5*10^6 |
6孔板 | 4ml | 6*10^6 |
3.將培養板置于細胞培養箱,37℃,5%CO2,靜置培養。
4.D3:半量換液。小心從原來的培養板孔中取出一半原有培養基,加入等量新鮮*培養基。
注:*培養基請恢復至室溫后使用,減少對細胞的刺激;考慮到培養過程中的液體揮發,加入新鮮*培養基時,可考慮多加10%體積*培養基。
5.D6:半量換液。同第4步。
6.D10:輕輕吹打細胞,收集懸浮細胞,即為分化成熟的小鼠穩態DC,可進行后續操作和分析。
注:如需研究特定刺激對DC的影響,可提前加入相應刺激,待D10收集細胞進行分析。數據展示
圖:小鼠穩態樹突狀細胞亞群分布。取4-6周齡雄性C57BL/6小鼠BM-MNC按照上述說明培養至第10天,收集懸浮細胞檢測DC產生和亞群分布。