詳細介紹
垂直電泳
一、蛋白質標準品
Precision Plus Protein標準品有未染、全藍、雙色、Kaleidoscope、WesternC和Dual Xtra六種選擇。全藍、雙色、Dual Xtra和WesternC含有三條高亮度參考條帶(25、50和75kD)方便凝膠方向的判斷。Precision Plus Protein標準品的特點如下:
l 清晰的窄條帶可用于精確的分子量估算;
l 精確的分子量數值,經質譜驗證;
l 的染色技術確保批次間分子量的*性,以及電泳遷移圖譜的良好重復性;
l 每個未染的蛋白條帶都含有一個*的Strep標記的親和多肽,可進行Western雜交檢測和分子量確定;
l 天然熒光便于多種熒光檢測;
l 適用于Criterion Stain Free凝膠成像系統。
Precision Plus Protein Dual Xtra標準品
Precision Plus Protein Dual Xtra標準品含有12條預染條帶,分子量范圍從2到250kD,可用來監測電泳和轉印效率。2kD和5kD條帶利于低分子量蛋白的檢測。粉色的2kD條帶易于從藍色染料前沿中辨識。Dual Xtra蛋白標準品的優點包括:
l 寬范圍分子量應用更廣;
l 2kD和5kD蛋白帶;
l 清晰、明亮,預染的12條蛋白帶可精確的進行分子量確定;
l 顯眼的粉色條帶作為參照和方向定位;
l 天然熒光屬性利于多元化應用;
l 分子量和遷移率的批次間具高度*性。
Precision Plus Protein WesternC 標準品
Precision Plus Protein WesternC 標準品含有10條蛋白條帶偶聯 StrepTactin 偶聯物可用于化學發光檢測蛋白條帶可顯示在凝膠轉印膜膠片或 CCD 圖像中預染條帶可檢測電泳過程評估轉印效果每個條帶均帶有 Strep-標簽可進行化學發光檢測。
優點包括:
l 高精確度計算MW-R值>0.99;
l 雙色預染條帶25、50和75 kD 3個條帶為粉色;其他條帶預染為藍色;
l 結果整潔清晰精確
l 所有條帶含有 Strep-標簽當使用 StrepTactin-HRP時可被化學發光檢測
l 天然熒光屬性利于多種應用
l 無需稀釋方便隨時使用
二、制膠試劑
丙烯酰胺
聚丙烯酰胺是一種常用的電泳基質,由丙烯酰胺與低聚物交聯劑(如甲叉雙丙烯酰胺,bis ) 的自由基聚合而成。可靠的電泳結果取決于這一反應的可重復性,高純度的起始試劑是影響凝膠質量的一個重要因素。Bio-Rad的99.9%超純丙烯酰胺經過嚴格的純化和測試,確保了凝膠聚合均一所需的一切品質。丙烯酰胺有3種形式,可滿足每個實驗室的需要:
■■ 丙烯酰胺粉劑 — 丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺粉劑產品使濃度和丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺比率可調
■■ 預混合丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺粉劑 — 含量固定的組份,直接加入量的超純水即可配制成30-50%的儲存液
■■ 丙烯酰胺預混液 — 可直接使用,有2種濃度 ( 30% 和40% ),3 種不同的丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺比例( 19:1,29:1 和 37.5:1 )
三、預混緩沖液
預混合電泳緩沖液
預混合轉印緩沖液
四、垂直電泳預制膠
Mini-PROTEAN TGX 預制膠
保質期更長的 Mini-PROTEAN TGX 預制膠為創新的凝膠系統,使用標準的Tris/甘氨酸電泳緩沖液可提供類似Laemmli的分離模式。Mini-PROTEAN 膠兼容 Mini-PROTEAN Tetra (1-4塊膠) 和 Dodeca 電泳槽(1-12 塊膠),這類膠還可用于 Mini-PROTEAN 3 電泳槽,同時提供轉印用Mini Trans-Blot 電泳槽和預切膜三明治。
優點包括:
■■ 直接用于Laemmli系統
■■ 緩沖體系不昂貴??低運行成本
■■ 電泳時間短
■■ 準確的分子量評估
■■ 適用于復雜樣品
■■ 底部開放式膠盒設計使凝膠的操作和轉印更方便
■■ 膠盒打開方便??更快進入下游實驗
五、蛋白染色劑
考馬斯染色劑
Bio-Safe 考馬斯亮藍G-250 染料
Bio-Safe 考馬斯染色劑G-250 染色劑是一種預混合的無毒溶液,脫色過程無需甲醇和醋酸。Bio-Safe 染色劑在清晰背景上產生藍色條帶。Bio-Safe 考馬斯染色劑的使用快速、靈敏、便利。優點包括:
??水相染色—無需特殊處理和通風櫥
??凝膠浸于染色劑時條帶隨即可見
??無廢液處理問題及費用
考馬斯亮藍R-250 染色劑和脫色液
考馬斯亮藍R-250 染色劑是對蛋白聚丙烯酰胺凝膠進行考馬斯染色的zui快速簡便的方法。考馬斯R-250 染色液和考馬斯R-250 脫色液可直接使用。
??檢測聚丙烯酰胺凝膠上納克級蛋白和核算
??高通量—能染色12 塊大規模凝膠(26.5*23cm)
??操作方便的濃縮液形式
銀染Plus 試劑盒
銀染Plus 是zui靈敏、使用zui簡便的銀染色劑。銀染Plus 試劑盒源于Gottlied 和Chavko(1987)所開發的檢測瓊脂糖凝膠上天然和變性真核DNA的方法。該試劑盒經化學改進,可用于檢測聚丙烯酰胺和瓊脂糖基質上的蛋白和核酸。
銀染Plus 試劑盒的特點:
??檢測納克級蛋白和核算
??防止凝膠基質上中的銀沉淀從而消除背景
??只需3 個步驟:固定,清洗和染色能染色40 塊小膠和13 塊大膠
熒光染料
Oriole 熒光凝膠染料
Oriole 熒光凝膠染料是一種即用,快速,靈敏和高線性的蛋白凝膠染料,可用來對SDS-PAGE 凝膠上的蛋白進行檢測和定量。無需固定,只需要一個步驟即可進行染色。因為無需脫色,蛋白樣品可在2 小時之內進行準確檢測和定量。
??快速熒光凝膠染色;包括成像,全過程不超過2 小時
??與隨后的蛋白酶解及質譜分析*兼容
??納克級靈敏度和低背景
??動態范圍寬(3 個數量級)
SYPRO Ruby 蛋白凝膠染料
該染料是雙向電泳中使用zui廣泛的染料。SYPRO Ruby 蛋白凝膠染料與質譜分析和以Edman 為基礎的測序兼容。優點包括:
l zui低靈敏度范圍為1-10ng
l 檢測糖蛋白、脂蛋白和金屬蛋白
l 不受樣品中外源核酸的干擾
l IEF 凝膠的理想選擇
Flamingo 熒光凝膠染料
Flamingo 熒光染料是一個10×儲存液,內含一種與變性蛋白質結合后就會發光的熒光染料。這種易用的熒光染料可配合激光為激發光源的的掃描儀應用于1-D 和2-D 蛋白質電泳分析。染色只需2 步,在5 小時內即可完成整個染色步驟。無需脫色并具有靈活的染色時間。染過的膠在2-8℃,暗處可保存6 個月而不會丟失圖像信號。Flamingo 染料可與質譜分析和以Edman 為基礎的測序相兼容。使用Flamingo 熒光凝膠染料染色的凝膠可以使用各種熒光成像系統成像。
??檢測的zui低靈敏度可以達到0.25-0.5ng
??線性可達0.5ng-1ug
??可用于IEF 膠染色
負染色劑
Bio-Rad 的負染色劑是基于凝膠上的金屬離子的選擇性沉淀,而蛋白帶不被染色和修飾。因為蛋白不被修飾,所以該沉淀方法*兼容隨后的應用,如質樸分析。Bio-Rad為聚丙烯酰胺凝膠提供兩種類型的負染色試劑。兩種染料的靈敏度都比考馬斯亮藍R-250 高。
鋅染色劑和脫色試劑盒
鋅染色劑和脫色試劑盒源于Fernandez-Patron 等(1992)的方法,是一種用于聚丙烯酰胺凝膠的可逆負染色劑。簡單的三步驟使您在15 分鐘內看到負染條帶。凝膠的白色背景在黑色背景下產生對比強烈的清晰條帶。凝膠在15 分鐘內*脫色,用于Western 雜交、氨基酸分析和N-端測序。
銅染色劑和脫色試劑盒
Bio-Rad 的銅染色劑和脫色試劑盒源于Lee et al.(1987)的方法,只需10分鐘就能看到SDS-PAGE 上的蛋白條帶。由于蛋白是負染,如果不進行蛋白洗脫和轉印,則不需要脫色步驟。
交聯劑和催化劑