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一步法SDS-PAGE AB液快速制膠試劑盒6%
  • 一步法SDS-PAGE AB液快速制膠試劑盒6%
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貨物所在地:北京北京市

更新時(shí)間:2023-11-28 14:28:06

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一步法SDS-PAGE AB液快速制膠試劑盒6%適用于蛋白聚丙烯酰胺凝膠的快速制備。本試劑盒采用上層膠和下層膠的預(yù)混配方,只需將試劑兩兩混合,加入促凝劑即可凝膠,簡(jiǎn)便快捷。所配的上層膠帶有顏色,方便點(diǎn)樣和區(qū)分不同凝膠。試劑盒提供的改良型促凝劑APS,具有良好的穩(wěn)定性和促凝效果,配膠過(guò)程中無(wú)需添加TEMED。本試劑盒可配制125塊mini PAGE膠(以 0.75 mm厚度膠計(jì)算)。

6% AB一步法液蛋白快速制膠試劑盒

貨號(hào)P0065

存儲(chǔ)條件APS,-30~-15℃保存,≤0℃運(yùn)輸,可在2~8℃保存至少3個(gè)月;其他組分,2~8℃保存。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

6% AB液蛋白快速制膠試劑盒適用于蛋白聚丙烯酰胺凝膠的快速制備。本試劑盒采用上層膠和下層膠的預(yù)混配方,只需將試劑兩兩混合,加入促凝劑即可凝膠,簡(jiǎn)便快捷。所配的上層膠帶有顏色,方便點(diǎn)樣和區(qū)分不同凝膠。試劑盒提供的改良型促凝劑APS,具有良好的穩(wěn)定性和促凝效果,配膠過(guò)程中無(wú)需添加TEMED。本試劑盒可配制125塊mini PAGE膠(以 0.75 mm厚度膠計(jì)算)。


產(chǎn)品組分

 

貨號(hào)

P0105

上層膠 A

P0065-1

80 ml

上層膠 B

P0065-2

80 ml

下層膠 A(6%)

P0065-3

250 ml

下層膠 B

P0065-4

250 ml

APS

P0065-5

8 ml


凝膠濃度選擇參照

貨號(hào)

試劑盒濃度

蛋白最佳分離范圍

P0065

6%

50-150KD

P0085

8%

30-130KD

P0105

10%

20-100KD

P0125

12%

10-70KD

P0155

15%

10-55KD


操作流程:

以制備一塊0.75/1.0/1.5 mm的PAGE膠為例。

下層膠配方

凝膠厚度

下層膠 A液

下層膠 B液

APS

0.75mm

2.0ml

2.0ml

40ul

1.0mm

2.7ml

2.7ml

60ul

1.5mm

4.0ml

4.0ml

80ul


上層膠配方

凝膠厚度

上層膠 A液

上層膠 B液

APS

0.75mm

0.5ml

0.5ml

10ul

1.0mm

0.75ml

0.75ml

15ul

1.5mm

1.0ml

1.0ml

20ul

1. 各組分在使用前請(qǐng)顛倒混勻6-8次。

2. 下層膠配制:取等體積下層膠A液和下層膠B液,各2.0/2.7/4.0 ml,混勻。

3. 上層膠配制:取等體積上層膠A液和上層膠B液,各0.5/0.75/1.0 ml,混勻。

4. 向步驟2的混合溶液中加入40/60/80 μl的APS,立即充分混勻,然后注入制膠玻璃板中,使液面距短玻璃板上沿約1.5cm。

1:此溶液一般過(guò)量,請(qǐng)勿全部注入。

2:混勻操作避免劇烈振蕩,在灌注的過(guò)程中避免將氣泡灌入制膠玻璃板中。

3:灌注下層膠后用ddH2O或醇封閉,待下層膠凝固后再灌注上層膠。

5. 向步驟3的混合溶液中加入10/15/20μl的APS,立即充分混勻,無(wú)需等待下層膠凝固,即可將混勻后的溶液輕緩注入制膠玻璃板中,輕輕插入梳齒。

注:灌注上層膠溶液可沿著長(zhǎng)玻璃板輕緩注入,避免將下層膠沖散。

6. 待膠凝固后(室溫約20-30 min),拔去梳齒即可用于電泳。

注:請(qǐng)盡量使用新鮮配制的電泳緩沖液。




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