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12% SDS-PAGE快速制膠試劑盒
產品貨號：P1250M
儲存條件：4oC保存，需避光。APS促凝劑 -20oC保存半年內有效。
產品簡介：
LABLEAD12% SDS-PAGE快速制膠試劑盒提供了簡單快速地配制12% SDS-PAGE凝膠所需的所有試劑，客戶只需自備制膠器具和蒸餾水，即可配制12% SDS-PAGE凝膠。LABLEAD SDS-PAGE快速制膠試劑盒系列產品有6%、8%、10%、12%和15%共5種常見濃度供選擇。本試劑盒把SDS-PAGE凝膠配制所需的Tric-HCl 、Acr-Bis(29:1) 、SDS等預混合成分離膠預混液和濃縮膠預混液，使用前僅需加入適量10% APS和TEMED即可簡單快速地完成分離膠和濃縮膠的配制。本試劑盒約可配制約100塊常規大小的12% SDS-PAGE凝膠。具體可以配制的凝膠數量和凝膠的厚薄以及凝膠的大小有關。
產品組分：
產品編號 | 產品名稱 | 規格 |
P1250M- 1 | 12% SDS-PAGE分離膠預混液 | 250ml |
P1250M-2 | SDS-PAGE濃縮膠預混液 | 120ml |
P1250M-3 | APS促凝劑 | 5ml |
P1250M-4 | TEMED | 0.5ml |
注意事項：
1、APS促凝劑應于-20oC保存。推薦APS分裝后保存。
2、分離膠預混液和濃縮膠預混液中含有Acr-Bis，對人體有毒，請做好防護。
3、TEMED易揮發，使用后請蓋緊瓶蓋。另，凝膠凝聚的速度和溫度及光照關系密切，可通過適當調節APS和TEMED的用量，控制在不同的室內環境下凝膠凝聚的速度。
4、TEMED易燃，有腐蝕性，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
5、本產品僅限于科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作步驟：
1. 根據目的蛋白的分子量大小選擇合適濃度的SDS-PAGE分離膠(即分離膠)。 不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍如下（僅供參考）：
SDS-PAGE分離膠濃度 | 最佳分離范圍 |
6%膠 | 50- 150kD |
8%膠 | 30-90kD |
10%膠 | 20-80kD |
12%膠 | 12-60kD |
15%膠 | 10-40kD |
2. 參考下表，按照1%的比例加入相應的APS促凝劑，按照0.04%的比例加入相應量的TEMED 。例如10ml 12% SDS-PAGE分離膠預混液中，加入100μl APS促凝劑和4μl TEMED。適當混勻后倒入到制膠模具中，用乙醇或蒸餾水封住液面，直至分離膠凝固充分。通常10-30分鐘內膠會凝固。
注：具體凝固時間和溫度及光照有關，為達到較好的凝固效果，當室溫較低時，可以適當同時加大10% APS 和TEMED的用量，例如20oC時建議用量是正常推薦用量的1.5倍，15oC時建議用量是正常推薦用量的2倍。
成分 | 配制不同體積 SDS-PAGE 分離膠所需各成分的體積 | |||||
12% SDS-PAGE 分離膠預混液 | 5 ml | 10 ml | 15 ml | 20 ml | 30 ml | 50 ml |
APS 促凝劑 | 0.05 ml | 0.1 ml | 0.15 ml | 0.2 ml | 0.3 ml | 0.5 ml |
TEMED | 2 ul | 4 ul | 6 ul | 8 ul | 12 ul | 20 ul |
3. 參考下表，分離膠凝固后，在SDS-PAGE濃縮膠預混液中，按照1%的比例加入相應量的10% APS溶液，按照 0.1%的比例加入相應量的TEMED。例如10ml SDS-PAGE濃縮膠預混液中，加入100μl APS促凝劑和10μl TEMED，適當混勻。去除分離膠上面覆蓋的液體，盡量去干凈，然后倒入添加了APS促凝劑和TEMED的 SDS-PAGE濃縮膠預混液，插入梳子待凝固。濃縮膠凝固后即可用于后續的電泳。
成分 | 配制不同體積 SDS-PAGE 濃縮膠所需各成分的體積 | |||||
SDS-PAGE 濃縮膠預混液 | 2 ml | 3 ml | 4 ml | 6 ml | 8 ml | 10 ml |
APS 促凝劑 | 0.02 ml | 0.03 ml | 0.04 ml | 0.06 ml | 0.08 ml | 0.1 ml |
TEMED | 2 ul | 3 ul | 4 ul | 6 ul | 8 ul | 10 ul |
4. 如配制好的凝膠如果當天不使用，可在4oC保存1-2天后使用。
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