中文名稱：T4 DNA連接酶

英文名稱：T4 DNA Ligase

CAS號：9015-85-4

分子量：55.3kDa，單體

T4 DNA連接酶

級別：BR

來源：含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌

活性定義：是指在ATP-PPi交換反應中，37℃、30分鐘內將1nmol [32PPi]轉換為Norit可吸收形式所需的酶量（weiss單位，1個weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位：20ul反應體系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分鐘內連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產物所需的酶量）

抑制劑：當反應體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時，可強烈抑制T4 DNA Ligase活性

失活：65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘

注意：T4 DNA Ligase與DNA結合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率，為避免此現象，電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下：樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存；轉化時，連接產物的體積不得超過感受態細胞體積中的10%；電轉化之前，先用氯fang抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase，然后經乙醇沉淀純化抽提產物

質量控制：測試表明無內切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測：粘性末端或平末端DNA的連接能力

性狀(以下信息僅供參考)：液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP

用途：本品僅供科研，不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接；雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接；雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復合體中缺口的修復；連接酶介導的RNA檢測；位點特異性突變；擴增片段長度多態性

保存： -20°C

我司相關產品：

果膠酶/粘膠質酶/Pectinase

果膠酶Y-23/Pectolyase Y-23

菠蘿蛋白酶/菠蘿酶/風梨酶/Bromelaine

木瓜蛋白酶/番木瓜酶/木瓜朊酶/番瓜酵素/木瓜酶/Papain

酸性蛋白酶/Acidic Protease

中性蛋白酶/分散酶/Neutral protease/Dispase

鏈霉蛋白酶/鏈絲菌蛋白酶/鏈霉菌蛋白酶/Pronase E

抗蛋白酶/Antipain dihydrochloride

膽固醇酯酶（豬胰）/膽甾醇酯酶（豬胰）/Cholesterol esterase

糖化酶/糖化淀粉酶/淀粉葡萄糖苷酶/Gluco-Amylase

葡萄糖氧化酶/GOX/GOD/Glucose oxidase

D-α-氨基氧化酶/D-氨基酸氧化酶/D-AAO

L-氨基酸氧化酶/L-AAO/TM-LAO/L-amino acid oxidase

己糖激酶/己糖磷酸激酶/Hexokinase from Saccharomyces cerevisiae

胃蛋白酶（豬胃粘膜）/胃液素/胃朊酶/蛋白酵素/酸腈酶/百布圣/Pepsin（porcine stomach mucose）

胰酶粉/胰酵素/胰醇素/胰液素/Pancreatin

胰蛋白酶（牛胰）/Trypsin(bovine pancreas)

胰蛋白酶（豬胰）/Trypsin(porcine pancreas)

脂肪酶（豬胰）/脂酶/脂肪水解酶/脂肪分解酵素/Lipase(pocine pancreas)

過氧化氫酶（牛肝）/氯化酵素/Catalase(bovine liver)

溶菌酶（蛋清）/脆壁質酶/球蛋白G/N-乙酞胞壁質聚糖水解酶/Lysozyme(Chinken egg)

溶葡球菌酶/溶葡萄球菌酶/Lysostaphin

氯化溶菌酶/Lysozyme chloride

纖維素酶（綠色木酶）/1,4-β-D-葡聚糖葡糖苷水解酶/Cellulase(Trichoderma Vride G)

纖維素酶R-10/1,4-β-D-葡聚糖葡糖苷水解酶/Cellulase Onozuke R-10