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氣相色譜定量分析內標法
選擇適宜的物質作為欲測組分的參比物,定量加到樣品中去,依據欲測組分和參比物在檢測器上的響應值(峰面積或峰高)之比和參比物加入的量進行定量分析的方法稱為內標法。內標法是一種間接或相對的校準方法。
采用內標法定量時,內標物的選擇是一項十分重要的工作。內標物應是原樣品中不存在的純物質,該物質的性質應盡可能與欲測組分相近,不與被測樣品起化學反應,同時要能*溶于被測樣品中。內標物的峰應盡可能接近欲測組分的峰,或位于幾個欲測組分的峰中間,但必須與樣品中的所有峰不重疊,即*分開。一般會選擇標準物質的同位素物質作為內標物。
影響內標和被測組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學方面的、色譜方面的和儀器方面的三類。
由化學方面的原因產生的面積比的變化常常在分析重復樣品時出現。
化學方面的因素包括:
1、內標物在樣品里混合不好;
2、內標物和樣品組分之間發(fā)生反應;
3、內標物純度可變等。
對于一個比較成熟的方法來說,色譜方面的問題發(fā)生的可能性更大一些,色譜上常見的一些問題(如滲漏)對面積的影響比較大,對面積比的影響則要小一些,但如果面積的變化已大到足以使面積比發(fā)生顯著變化的程度,那么一定有某個重要的色譜問題存在,比如進樣量改變太大,樣品組分濃度和內標濃度之間有很大的差別,檢測器非線性等。進樣量應足夠小并保持不變,這樣才不致于造成檢測器和積分裝置飽和。
如果認為方法比較可靠,而色譜固看來也是正常的話,應著重檢查積分裝置和設置、斜率和峰寬定位。對積分裝置發(fā)生懷疑的有力的證據是:面積比可變,而峰高比保持相對恒定。
優(yōu)點:進樣量的變化,色譜條件的微小變化對內標法定量結果的影響不大,特別是在樣品前處理(如濃縮、萃取,衍生化等)前加入內標物,然后再進行前處理時,可部分補償欲測組分在樣品前處理時的損失。若要獲得很高精度的結果時,可以加入數種內標物,以提高定量分析的精度。
缺點:選擇合適的內標物比較困難,內標物的稱量要準確,操作較麻煩。不適用于快速分析。