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微波消解-紫外分光法測定富硒沼澤紅假單胞菌中的硒含量
沼澤紅假單胞菌是紅螺菌科紅假單胞菌屬的一種能進行光合作用的細菌,是唯yi由國家農業部批準作為飼料添加劑使用的光合細菌,富硒沼澤紅假單細胞菌是以還原態的硒化物作為電子供體培養而成的一種含有有機硒化物的菌體,菌體內不僅有大量的有機硒還有豐富的營養物質。硒是生物體必需的微量元素之一,具有多重的生物學功能。它能激發動物免疫球蛋白及抗體的產生,提高機體免疫力;可以保護心肌,防治克山病、大骨節病、地方性甲狀腺腫等多種疾?。晃⒘康奈€有抗癌和改善心肌等功能。研究表明,通過喂食富硒沼澤紅假單胞菌可以增強動物肌體清除自由基的能力,抑制脂質過氧化物的形成,維持機體抗氧化系統的平衡,提高免疫功能等。硒的攝入不足會給人喝動物造成多種傷害影響生物體的正常功能,損害機體免疫力,造成多種疾病,而過量的硒又會在體內造成毒性傷害。因此,快速準確測定富硒菌體中的微量元素硒含量十分重要。
傳統的樣品消解方法(如熔融法、濕法消解法等)通常在常壓敞開條件下進行,加熱條件要嚴格控制,且此消解方法操作復雜,耗時長,一般需要幾小時至一天,試劑用量大,勞動強度大。與此相比,微波消解法條件容易控制,加熱快、升溫高,消解時間數十分鐘,反應封閉,避免了揮發損失和樣品之間的玷污,提高了分析的準確度和精密度。目前,國內外微量硒的測定方法主要有:原子光譜法、熒光法、中子活化分析法等,雖然這些方法靈敏度較高,但大多操作繁瑣復雜,要求苛刻,并且儀器設備昂貴,使用受到了限制。分光光度法儀器便宜、操作簡便、靈敏快速,在生產和生活中各個領域的檢測中一直廣為應用,適于基層實驗室使用,。本研究采用微波消解-紫外分光光度法測定富硒沼澤紅假單胞菌中的微量元素硒含量,考察了影響微量元素硒測定的各種因素,優化了各種操作條件,具有操作方便、靈敏度高、快速準確等特點,結果令人滿意。
儀器準備
UV1700系列 紫外可見分光光度計
UV1700PC UV Visible Spectrophotometer
簡介 : 本產品采用全新設計的比例監測雙光束學系統,具有優良的光學性能,使用方便,是實驗室分析*的基本儀器之一。
應用領域: 各種涉及水和廢水分析領域的通用儀器,應用范圍包括市政和工業廢水、飲用水、加工過程用水、地表水、冷卻水和鍋爐補給水等。
富硒沼澤紅假單胞菌樣品的制備:
配置硒濃度100μg/mL培養基,5%接種量,關照強度1500-2000lux,30℃下培養七天,然后進行菌種處理,4000rpm條件下離心20min,棄去上清液,用去離子水漂洗,重復操作三次,后收集菌體,恒溫箱(70℃)中干燥至恒重,研磨成粉,置于干燥器中待用。
測定結果: