目錄:優利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 復蘇/凍存NCI-H522 人非小細胞肺癌腺癌細胞
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
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貨號 | YLK-XB1317h | 應用領域 | 化工,生物產業 |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | NCIH522 |
NCI-H522 人非小細胞肺癌腺癌細胞(STR鑒定)
簡介:
該細胞系是由A.F. Gazdar、H.K. Oie、J.D. Minna及其同事從一名58歲白色男性吸煙肺癌患者治療前獲得的。 這是一種亞三倍體人類細胞系,其模態染色體數出現在 68% 的計數細胞中。多倍體細胞發生率為 3.0%;所有細胞共有 11 條標記染色體,其中兩條是配對的。標記包括:der(6)(q13)、t(7p17q)、del(10)(p11.23)、配對 der(7)t(7;?17)(p22;?q21.1) 和 der( 16)t(16;?)(q24;?) 和其他六個;正常 Y、N13、N15 和 N16 不存在;X染色體大多是成對的。這些細胞攜帶 TP53 基因密碼子 191 的突變。細胞不能合成肽神經調節蛋白 B (NMB) 或胃泌素釋放肽 (GRP)。細胞對角蛋白和波形蛋白染色呈陽性,但對神經絲三聯體蛋白呈陰性。
細胞特性:
1) 來源:肺 腺癌;非小細胞肺癌;第二階段
2) 形態:上皮細胞樣 貼壁、單細胞和松散附著的簇
3) 含量:>1x106 細胞數
4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
運輸和保存:
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的注意事項:
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完培6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完培來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。
培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備1640培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
細胞處理:
1) 凍存細胞的復蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完培重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完培的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
NCI-H522 人非小細胞肺癌腺癌細胞(STR鑒定)
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