人胰腺癌組織源星狀細胞
產品名稱 ：人胰腺癌組織源星狀細胞
產品貨號 ：YLK-XB0718h
組織來源 ：胰腺癌組織
產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介：
胰腺癌組織源星狀細胞分離自患有胰腺癌病人的胰腺癌組織。胰腺癌是一種惡性程度很高，診斷和治療都很困難的消化道惡性腫瘤，約90% 為起源于腺管上皮的導管腺癌。其發病率和死亡率近年來明顯上升。5年生存率< 1% ，是預后最差的惡性腫瘤之一。胰腺癌早期的確診率不高，手術死亡率較高，而治yu率很低。胰腺癌的病因尚不十分清楚。其發生與吸煙、飲酒、高脂肪和高蛋白飲食、過量飲用咖啡、環境污染及遺傳因素有關。
近年來的調查報告發現糖尿病人群中胰腺癌的發病率明顯高于普通人群。也有人注意到慢性胰腺炎病人與胰腺癌的發病存在一定關系，發現慢性胰腺炎病人發生胰腺癌的比例明顯增高。另外還有許多因素與此病的發生有一定關系，如職業、環境、地理等。隨著醫學技術的進步，大部分癌癥的生存率都在提高，例如乳腺癌，結直腸癌等腫瘤，近幾十年來，生存率得到了大幅度的提升。但胰腺癌的生存率一直停滯不前，缺乏有效的治療方法，ji高的死亡率使其成為“癌中zhi王"，近年來胰腺癌微環境的研究引起了諸多學者的重視。胰腺癌微環境構成復雜，其中，胰腺星狀細胞是胰腺癌微環境中最重要的間質細胞之一，在胰腺癌細胞生長、遷移、侵襲、血管生成、免疫逃逸、轉移及化/療耐藥中發揮重要的作用。
因此針對胰腺星狀細胞和胰腺癌細胞相互作用的研究有望提高胰腺癌患者的預后。胰腺星狀細胞(p an creatic stellate cells,PSC )是一種胰腺特異性間質細胞，多在胰腺組織內血管和導管周圍聚集，環繞在腺泡的基底部位，正常靜比狀態下只占胰腺細胞的4% 左右，細胞質中含有豐富的維生素A 脂滴，以表達膠質纖絲酸性蛋白質(glialfilam entacidic protein,G FA P )、結合蛋白(D esmin)為特征。在胰腺組織損傷、應激等條件下PSC 被激活，成為一種肌成纖維細胞，胞質中富含維生素A 的脂滴消失，以表達α-平滑肌肌動蛋白(α-sm oothm uscle actin,α -SM A )為標志，能大量合成細胞外基質(extracellularm atrix,ECM )和分泌多種細胞因子。
胰腺癌微環境中存在大量激活的PSC，在胰腺癌的發生發展中起著重要作用。PSC 通過誘導胰腺癌細胞(pancreatic cancercells,PC C )上皮一間質轉變(epithelial-m esenchym altran sition,EM T)促進胰腺癌侵襲和轉移侵襲和轉移是腫瘤細胞脫離原發腫瘤灶到達靶器官的一個多步驟過程，眾多研究表明EM T與胰腺癌的侵襲轉移密切相關。EM T最主要的特征是上皮細胞特征丟失同時伴間質細胞特征獲得，如E一鈣茹蛋白(E-cadherin)表達下降，波形蛋白(Vim entin )表達上調。karn evi等研究發現，PSC 與PC C 共培養后能夠誘導PC C 上皮性細胞標志(E-cadherin,β -catenin)丟失，促進間質性細胞標志(Vim entin,Snai-1）獲得，表明PSC 在PC C 的EM T 形成過程中發揮了重要的作用。PSC 參與胰腺癌進展的各個環節，而PSC 活化是PSC 發揮功能的重要部分。因此，如能抑制PSC 活化或控制PSC 細胞功能將為胰腺癌綜合/治療提供潛在的治療策略。因此，隨著針對抑制PSC活化或其功能的研究的深入，有望從胰腺癌微環境角度切實提高胰腺癌的綜合/治療效果。
質量檢測
優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ：含FBS、EG F、Insulin、Penicillin、Streptom ycin等
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：成纖維細胞樣
傳代特性 ：可傳2-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養條件 ：氣相：空氣，95% 。C O2，5%
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決
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