人晶狀體上皮細胞
產品名稱 ：人晶狀體上皮細胞
產品貨號 ：YLK-XB0621h
組織來源 ：晶狀體組織
產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介：
晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織。晶狀體源自胚胎發育外胚層，僅含有上皮細胞及其產物，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞分開。
因而，晶狀體上皮細胞培養既無神經和血管組織的干擾，又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染，保證了培養中細胞成分的單一性。晶狀體上皮細胞主要負責調節晶狀體的生理平衡，包括電解質和液體的輸送。在正常的發育過程中，晶狀體上皮細胞分化和成熟，然后遷移到晶狀體內部，產生晶體蛋白，自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞，并最終失去細胞核和其它的細胞器。
研究表明，晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調控，包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規則多角形，呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內表面的單層上皮細胞，其異常增殖和分化與白內障和后囊混濁的發生密切相關，體外培養是研究其生長規律的主要手段。
質量檢測
優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 ：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養 基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態 ：上皮細胞樣
傳代特性 ：可傳2-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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