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前言

地膚子是藜科植物地膚的干燥成熟果實(shí) ,具有清熱利濕、抗炎、抗過(guò)敏、抗搔癢等功效,常用于治療小便澀痛、風(fēng)疹、濕疹、皮膚搔癢等癥狀。地膚子主要含三萜皂苷、生物堿、黃酮類(lèi)等成分，其中三萜皂苷類(lèi)成分主要為地膚子皂苷Ic。由于地膚子皂苷Ic在200nm左右有末端吸收，使用常規(guī)的紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，往往基線噪音大，靈敏度較低。建議使用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）對(duì)地膚子中地膚子皂苷Ic進(jìn)行檢測(cè)。

本篇文章參考了《中國(guó)藥典》中地膚子的含量測(cè)定項(xiàng)下高效液相色譜法色譜條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置蒸發(fā)光散射檢測(cè)器對(duì)地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，地膚子皂苷Ic對(duì)照溶液（500μg/mL）分別進(jìn)樣10μL、20μL，地膚子皂苷Ic色譜峰的理論塔板數(shù)均高于3000，滿足實(shí)驗(yàn)分析需求。標(biāo)曲實(shí)驗(yàn)采用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，地膚子皂苷Ic標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好，線性相關(guān)系數(shù)＞0.999，滿足實(shí)驗(yàn)分析需求。地膚子皂苷Ic溶液（500μg/mL，10μL）重復(fù)進(jìn)樣5次，保留時(shí)間RSD值為0.265%，峰面積RSD值為0.564%。地膚子皂苷Ic溶液（500μg/mL，20μL）重復(fù)進(jìn)樣5次，保留時(shí)間RSD值為0.088%，峰面積RSD值為0.403%，重復(fù)性較好。取地膚子作為測(cè)試樣品，根據(jù)地膚子皂苷Ic標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰保留時(shí)間進(jìn)行定性，對(duì)地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，地膚子藥材中含地膚子皂苷Ic 3.5 %，滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。說(shuō)明該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足對(duì)地膚子藥材中地膚子皂苷Ic的檢測(cè)需求。

關(guān)鍵詞：地膚子皂苷Ic；高效液相色譜法；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器；地膚子。

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 儀器配置

1.3測(cè)試條件

1.4溶液配制和測(cè)定方法

地膚子皂苷Ic對(duì)照溶液（500μg/mL）

取地膚子皂苷Ic對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含0.5mg的溶液，即得。

２ 結(jié)果與討論

２.1 系統(tǒng)適用性

說(shuō)明：由上述譜圖可見(jiàn)，地膚子皂苷Ic對(duì)照溶液（500μg/mL）分別進(jìn)樣10μL、20μL，地膚子皂苷Ic色譜峰的理論塔板數(shù)均高于3000，滿足實(shí)驗(yàn)分析需求。

２.２ 標(biāo)準(zhǔn)曲線

說(shuō)明：在使用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器時(shí)，由于散射光的信號(hào)為非線性的，根據(jù)ELSD的工作原理，進(jìn)樣質(zhì)量（μg）和ELSD檢測(cè)器的響應(yīng)值（峰面積A）一般不呈現(xiàn)良好的線性。因?yàn)樾盘?hào)的響應(yīng)值與物質(zhì)質(zhì)量的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系，如果對(duì)進(jìn)樣質(zhì)量和峰面積分別取常用對(duì)數(shù)后，兩者呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，但是它是一條不經(jīng)過(guò)原點(diǎn)的直線，所以在應(yīng)用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（HPLC-ELSD）進(jìn)行藥物含量測(cè)定時(shí)必須使用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算。本次測(cè)試分別精密吸取地膚子皂苷Ic對(duì)照溶液（500μg/mL）10μL、20μL，注入液相色譜儀，測(cè)定。地膚子皂苷Ic標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好，線性相關(guān)系數(shù)＞0.999，滿足實(shí)驗(yàn)分析需求。

2.3 重復(fù)性

說(shuō)明：地膚子皂苷Ic溶液（500μg/mL，10μL）重復(fù)進(jìn)樣5次，保留時(shí)間RSD值為0.265%，峰面積RSD值為0.564%。地膚子皂苷Ic溶液（500μg/mL，20μL）重復(fù)進(jìn)樣5次，保留時(shí)間RSD值為0.088%，峰面積RSD值為0.403%，重復(fù)性較好。

2.4 樣品測(cè)試

說(shuō)明：根據(jù)地膚子皂苷Ic標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的保留時(shí)間進(jìn)行定性，對(duì)地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，地膚子含地膚子皂苷Ic 3.5 %，滿足標(biāo)準(zhǔn)中大于1.8 %的要求。

2.5 注意事項(xiàng)

（1） 地膚子皂苷Ic對(duì)照溶液需避光保存。

（2） 在制備相關(guān)溶液時(shí)需要注意佩戴好實(shí)驗(yàn)室防護(hù)用品。

３ 結(jié)論

本篇文章參考了最新版《中國(guó)藥典》中地膚子的含量測(cè)定項(xiàng)下高效液相色譜法色譜條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置蒸發(fā)光散射檢測(cè)器對(duì)地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，地膚子皂苷Ic對(duì)照溶液（500μg/mL）分別進(jìn)樣10μL、20μL，地膚子皂苷Ic色譜峰的理論塔板數(shù)均高于3000，滿足實(shí)驗(yàn)分析需求。標(biāo)曲實(shí)驗(yàn)采用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，地膚子皂苷Ic標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好，線性相關(guān)系數(shù)＞0.999，滿足實(shí)驗(yàn)分析需求。地膚子皂苷Ic溶液（500μg/mL，10μL）重復(fù)進(jìn)樣5次，保留時(shí)間RSD值為0.265%，峰面積RSD值為0.564%。地膚子皂苷Ic溶液（500μg/mL，20μL）重復(fù)進(jìn)樣5次，保留時(shí)間RSD值為0.088%，峰面積RSD值為0.403%，重復(fù)性較好。取地膚子作為測(cè)試樣品，根據(jù)地膚子皂苷Ic標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰保留時(shí)間進(jìn)行定性，對(duì)地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，地膚子藥材中含地膚子皂苷Ic 3.5 %，滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。說(shuō)明該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足對(duì)地膚子藥材中地膚子皂苷Ic的檢測(cè)需求。