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應用領域 | 醫療衛生,環保,生物產業 |
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Midori Green Advance DNA 染色劑
Midori Green Advance DNA 染色劑 DNA 染色劑
溴化乙錠的安全替代品
MIDORI Green Advance 可以染色單鏈和雙鏈核酸,其靈敏度與溴化乙錠 (EtBr) 相似。與 EtBr 一樣,Midori Green
Advance 在凝膠澆注步驟中直接添加到熔融瓊脂糖中。這使它成為您實驗室當前協議的直接替代品。您不僅可以使用
現有的 UV 透射儀和濾光片套件 — MIDORI Green Advance 與藍色 LED 或特別是藍色/綠色 LED配合使用時效果非常好-
基于照明器和凝膠文件系統。這些環保的光臺是任何 MIDORI Green 染色劑的很好補充,因為您可以在切除條帶或成像
遷移時無防護罩和無護目鏡工作。由于藍光或綠光不會交聯 DNA,因此您無需擔心在克隆和拍攝過程中會損壞 DNA。
MIDORI Green Advance 即使對小的 DNA 片段也顯示出非常高的靈敏度。MIDORI Green Advance 的稀釋倍數可高達 1:25000。因此,對于 100 mL 瓊脂糖凝膠而言,4 μL 到 6 μL 就足夠了,因此每 1 mL MIDORI Green Advance 管中大約有 17 到 25 升染色的瓊脂糖凝膠。
*測試您的安全
無毒。非誘變。MIDORI Green Advance 核酸染料是我們測試*的傳統溴化乙錠 (EtBr) 染料的替代品。五種不同的測試顯示它是多么安全。與 EtBr 相比,已知是一種強誘變劑;MIDORI Green Advance 在 Ames 測試中引起的突變要少得多,這是*的識別誘變劑的行業標準。Ames 試驗中的高致突變性通常與致癌物和致畸物有關。MIDORI Green Advance 在小鼠骨髓微核試驗和染色體畸變試驗中也得分為陰性,這表明它被認為是非致癌物質——與 EtBr 不同。安全的另一面是毒性,所有的 MIDORI Green 污漬也都經過測試無毒!所以這些污漬不需要作為危險廢物處理;與 EtBr 和其他一些“安全 DNA 染料"不同,可以按照標準實驗室程序進行處理,使技術人員和學生的實驗室使用變得簡單和安全。對于那些喜歡更加安全的人來說,
三個組成一個幸福
的家庭 核心 MIDORI Green 分子已被配制成三種不同的綠色熒光染料,針對您的實驗室需求進行了優化。先是 MI
DORI Green Advance,它提供出色的信噪比和對短核酸片段的可靠靈敏度。MIDORI Green Advance 在運行樣品之前
添加到瓊脂糖凝膠中(很像 EtBr),當使用藍色 LED 或 Nippon Genetics 的藍/綠 LED 技術進行可視化時,提供與
EtBr 相當的檢測靈敏度. 第二種是 MIDORI Green Direct,旨在與您的樣品混合并加載到無染色凝膠上。MIDORI Green
Direct 包含上樣染料,可將核酸片段檢測到與 MIDORI Green Advance 相似(如果不是稍好)的水平。該系列的*成
員是 MIDORI Green Xtra。與 Advance 一樣,Xtra 被添加到熔融的瓊脂糖和緩沖液中。它的化學結構針對藍/綠和藍色
LED 燈進行了優化,從而在瓊脂糖凝膠中產生的 DNA 和 RNA 熒光信號。MIDORI Green Advance 和
MIDORI Green Direct 染料與紫外線兼容,但在使用紫外線而不是 LED 的非破壞性可見激發光時效率略低。對于實驗室
而言,重要的是,MIDORI Green Xtra 不會對瓊脂糖凝膠進行染色,從而獲得出色的信噪比。
對您更安全,對您的亞克隆更好
通過使用安全的 MIDORI Green 染料和安全的藍/綠 LED 照明,您可以將亞克隆轉化效率提高三倍. 在下面的示例中,
質粒載體用合適的限制性內切酶雙重消化,產生兩個粘性末端 DNA 片段:lacZ 基因 (3,536 bp) 和載體骨架 (4,318 bp)
。在 1% 瓊脂糖凝膠上對等量的消化 DNA 進行電泳。根據相應的手冊,用溴化乙錠或 MIDORI Green Direct 凝膠染料對
凝膠進行染色,然后分別使用 UV 透射儀或 FastGene 藍/綠 LED 照明器進行觀察。從凝膠上切下兩個 DNA 片段并使用
基于硅膠膜的純化試劑盒進行純化。使用轉化到 DH5a 細胞中的 T4 DNA 連接酶將 lacZ 基因和載體骨架重新連接并鋪板
到選擇板上。計數藍色和白色菌落的總數以評估克隆效率。每個實驗一式三份進行,并確定平均克隆效率。MIDORI
Green Direct 導致陽性轉化體的顯著增加。
溴化乙錠通常與強紫外光源結合使用,以在連接反應之前切除 DNA 條帶以進行純化。大家都知道的,短波長光會導致胸
腺嘧啶二聚體并破壞 DNA。這種損害的程度并不總是受到重視。高能光在幾秒鐘內就對 DNA 片段造成嚴重破壞。如下所
示,在標準瓊脂糖凝膠中僅暴露 15 秒 DNA 后,克隆效率開始下降。曝光 30 秒后,你的克隆實驗幾乎死了!相比之下,
使用藍色 LED 或 Nippon Genetics 的超高性能藍色/綠色 LED 的方案的克隆效率*不受這種有害影響的影響。如果
您的實驗室無法擺脫溴化乙錠的習慣,請使用藍/綠 LED 照明器(或成像系統)仍應對 DNA 完整性和克隆效率產生直接的
積極影響。
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