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島津高效液相色譜柱選擇的條件有哪幾點(diǎn)？

閱讀：1413 發(fā)布時(shí)間：2022-4-24

島津液相色譜柱按分析成分可分為反向色譜柱，HILIC色譜柱，正相色譜柱，離子交換色譜柱，制備液相色譜柱，毛細(xì)管液相色譜柱，聚合物基質(zhì)色譜柱，專用色譜柱等，島津液相色譜柱具有高惰性、高保留和低柱壓，性價(jià)比高。

島津高效液相色譜柱選擇的條件有哪幾點(diǎn)？

1、填料基質(zhì)

（1）硅膠基質(zhì)：純度高本錢低，強(qiáng)度大，化學(xué)修飾輕易，但pH值范圍有限。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩(wěn)定，但經(jīng)過(guò)特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10。

（2）聚合物基質(zhì)：應(yīng)用pH值范圍寬，溫度穩(wěn)定（高溫可以達(dá)到80度以上），機(jī)械強(qiáng)度小。

2、顆粒外形

大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒，但有時(shí)是不規(guī)則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長(zhǎng)的島津高效液相色譜柱壽命在使用高粘度的活動(dòng)相時(shí)；不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對(duì)低廉的價(jià)格。

3、顆粒粒徑

粒徑越小柱效越高、分離度越高，但同時(shí)會(huì)導(dǎo)致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復(fù)雜樣品，UPLC可以使用1.5μm的填料；另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。

4、含碳量

含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例，與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。高含碳量進(jìn)步柱容量、分辨率及分析時(shí)間，用于要求高分離度的復(fù)雜樣品；低含碳量分析時(shí)間短、展現(xiàn)不同的選擇性，用于快速分析簡(jiǎn)單樣品及需要高含水活動(dòng)相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。

5、孔徑和比表面積

HPLC吸附介質(zhì)是多孔的顆粒，盡大多數(shù)的反應(yīng)表面于孔內(nèi)。因此，分子必須進(jìn)進(jìn)孔內(nèi)才能被吸附和分離。孔徑和比表面積是相輔相成的兩個(gè)概念。孔徑小比表面積大，反之亦然。島津高效液相色譜柱比表面積大，增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng)，增加保存，上樣量和復(fù)雜成分的分離度；比表面積小，平衡時(shí)間快，適合梯度分析。

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