實驗室離心機常用的離心方法
1.差速離心法:采用不同的離心速度和離心時間,使沉降速度不同的顆粒分步離心的方法,稱為差速離心。操作時,將含有兩種不同顆粒的混懸液,以常速離心,使大的顆粒下沉,將上清液傾倒于另一離心管中,再加大離心力,離心一定時間,分離小的顆粒,反復多次分離,達到分離目的。差速離心主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。差速離心法的優點是:操作簡單,離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開,并可使用容量較大的角式轉子。
2.密度梯度離心法:該法又分為速率區帶離心法和等密度區帶離心法。樣品在一定惰性梯度介質中進行離心沉淀或沉降平衡,在一定離心力下把顆粒分配到梯度液中某些特定位置上,形成不同區帶的分離方法。該法的優點是:具有很好的分辨率,分離效果好,可一次獲得較純顆粒;適用范圍廣,既能分離沉淀系數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度的顆粒;顆粒不會積壓變形,能保持顆粒活性,并防止已形成的區帶由于對流而引起混合。被離心的物質根據其沉降系數不同進行分離,同類物質則因分子大的沉降速度快于分子小的物質從而得到分離。密度梯度的制備可采用梯混合器,也可將不同濃度的蔗糖溶液,小心地一層層加入離心管中,越靠管底,濃度越高,形成階梯梯度。在密度梯度離心過程中,區帶的位置和寬度隨離心時間的不同而改變。隨離心時間的加長,區帶會因顆粒擴散而越來越寬。
3.分析性超速離心法:分析型超速離心機主要由一個橢圓形的轉子、一套真空系統和一套光學系統所組成。該轉子通過一個柔性的軸連接成一個高速的驅動裝置,此軸可使轉子在旋轉時形成自己的軸。轉子在一個冷凍的真空腔中旋轉,其容納兩個小室:分析室和配衡室。分析室的容量一般為1mL,呈扇形排列在轉子中,其工作原理與一個普通水平轉子相同。分析室有上下兩個平面的石英窗,離心機中裝有的光學系統可保證在整個離心期間都能觀察小室中正在沉降的物質,可以通過對紫外光的吸收或折射率的不同對沉降物進行監測。