DNase Ⅰ（蛋白提取用）

產品貨號：T11190

產品規格：10KU

產品簡介：

脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一種非特異性核酸酶切酶，可用于降解單鏈或雙鏈DNA，其原理為DNaseⅠ水解磷酸二酯鍵產生帶有5'-磷酸基團和3'-OH的單核苷酸或寡核苷酸。本產品能迅速水解核酸，降低粘度以減少處理時間和增加蛋白產量。該酶可以與細菌蛋白提取液和RIPA裂解液等蛋白抽提試劑配合使用。

本產品RNase活性未檢測，不能用于反轉錄反應（RT-PCR）中DNA的去除使用。RT-PCR中DNA污染的去除請選擇RNase-free DNase I。

產品組成：

活性定義：

One unit of the enzyme completely degrades 1μg of DNA in 10 min at37°C. 

DNaseI溶解液組份：

20mM sodium acetate pH 6.5, containing 5mM CaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol.

DNaseI失活或抑制：

加入EDTA至終濃度為2.5mM后，65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑，達到毫摩爾/升濃度的鋅離子，0.1%的SDS，DTT、巰基乙醇等還原劑，50-100mM以上鹽濃度均對DNase I有顯著抑制作用。

使用方法：

1. DNase I溶液的配制：取5ml DNase I溶解液全部加到DNase I粉末中，充分混勻，配成濃度為2000U/ml DNase I溶液。-20℃貯存。

2. 蛋白提取液中按照1/100體積加入DNase I溶液（使其終濃度為20U/ml），1/100體積加入1MMgCl₂，37℃處理30-60分鐘。

注：由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca²⁺和Mg²⁺，蛋白初始裂解液中要去除EDTA，否則會降低DNase的消化能力。

3. 繼續后續蛋白提取實驗。

保存：-20℃粉末未配制有效期3年；DNaseI配制成溶液后-20℃有效期一年。