植物總酚含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1798

產(chǎn)品規(guī)格：120T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

酚類物質(zhì)是植物體中重要的次生物質(zhì)，對(duì)植物生長發(fā)育有一定的調(diào)節(jié)作用，能夠清除自由基起到抗氧化的作用，并具有較高的營養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用，同時(shí)在植物抗病、基因的誘導(dǎo)表達(dá)和生物固氮等方面也具有重要作用，在化妝品、食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。酚類物質(zhì)在堿性條件下能夠?qū)㈡u鉬酸還原生成藍(lán)色化合物，產(chǎn)物在760nm處具有特征吸收峰，通過吸光值的變化即可定量檢測(cè)植物中總酚的含量。

產(chǎn)品組成：

操作步驟(僅供參考)：

1. 植物總酚的提取（可根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例）：植物樣本烘干至恒重，粉碎后過30-50目篩；稱取約100mg粉碎樣本，加入2mL提取液，超聲提取（60℃，功率300W，超聲5s，間歇8s，總時(shí)間30min），12000rpm常溫離心10 min，取上清即為待測(cè)樣本。

2. 測(cè)定步驟：①分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至760nm，蒸餾水調(diào)零。

②在96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列試劑：

吸光值測(cè)定：測(cè)定760nm處吸光值，記為A測(cè)定、A對(duì)照、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白；計(jì)算?A測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照，?A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。注：每個(gè)測(cè)定組均需設(shè)一個(gè)對(duì)照組，空白組只需測(cè)定1-2次。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：以0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125mg/mL為橫坐標(biāo)（x），以其對(duì)應(yīng)的?A標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)（y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b，將?A測(cè)定帶入公式中得到x（mg/mL）。

3. 植物總酚含量計(jì)算

①按植物樣本蛋白濃度計(jì)算

總酚含量(mg/mg prot)= x×V提取/(Cpr×V提取)=x/Cpr

②按植物樣本質(zhì)量計(jì)算

總酚含量(mg/g)=x×V提取/W=2×x/W

注釋：V提：提取液總體積，2mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g。

注意事項(xiàng)：

1. 若測(cè)定吸光值超出標(biāo)準(zhǔn)吸光值線性范圍，建議適當(dāng)增加樣本量或?qū)⒋郎y(cè)樣本適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改。

2. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失，測(cè)定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書（以實(shí)際收到說明書內(nèi)容為準(zhǔn)），確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分，操作步驟是否清楚，且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)定。