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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 500ml |
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貨號 | T16241 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
枸櫞酸鹽緩沖液(0.01M,pH=4.4)
產品貨號:T16241
產品規格:500ml
產品簡介:
細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導致細胞內抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇,同時蛋白之間發生交聯而使抗原決定簇隱蔽,導致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現一些假陰性染色結果。所以要求在進行免疫組化染色時,需要*行抗原修復或暴露,即將固定時分子之間所形成的交聯破壞,而恢復抗原的原有空間形態。從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高檢測的準確性。
枸櫞酸鹽緩沖液(0.01M,pH=4.4)是一種常用的抗原修復液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。可以有效去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯,充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
通常石蠟切片都需進行抗原修復處理,而冰凍切片可以不進行抗原修復處理。抗原修復可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當冰凍切片免疫染色效果不理想時,考慮進行抗原修復。
按照每個片子需要10ml抗原修復液計算,500ml抗原修復液可以用于50個樣本的抗原修復。
產品組成
名稱 | 規格 | 保存條件 |
枸櫞酸鹽緩沖液(0.01M,pH=4.4) | 500ml | 2-8℃ |
使用方法:
1. 對于石蠟切片:
a. 脫蠟:二甲苯3次,每次3-5min→ 無水乙醇2次,每次3-5min→ 95%乙醇1次,3-5min→ 90%乙醇1次,3-5min→ 75%乙醇1次,3-5min→ 蒸餾水洗2次,每次3-5min。
b. 抗原修復:將切片浸泡在枸櫞酸修復液中,95-100℃加熱約15min (加熱時間可以控制在10-20min內,最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。枸櫞酸修復液使用前需預熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在20-30min內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次,每次3-5min。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。
2. 對于冰凍切片:
用免疫染色洗滌液洗滌切片5min。將切片浸泡在枸櫞酸修復液中,95-100℃加熱約15min (加熱時間可以控制在10-20min內,最佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。枸櫞酸修復液使用前需預熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。隨后大約在20-30min內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次,每次3-5min。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。
3. 對于其它樣品的抗原修復,可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。
注意事項 :抗原修復過程可以使用尚寶的的抗原修復盒進行操作。
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