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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100T |
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貨號 | BA1713-100 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
銅檢測試劑盒(Cuprizone微板法)
產品貨號:BA1713
產品規格:100T
產品簡介:
銅是人體重要的微量元素,是酶的重要組成部分,如銅藍蛋白(亞鐵氧化酶)、超氧化物歧化酶、細胞色素氧化酶等,總含量約為90mg,有90-95%的銅與球蛋白結合,形成銅藍蛋白;5-10%的銅與清蛋白結合,清蛋白可作為血漿銅的載體。銅的檢測方法有分光光度計、原子吸收光譜法、中子活化分析法等。
尚寶生物 銅檢測試劑盒(Cuprizone微板法)檢測原理是在酸性介質中與白蛋白結合的銅從白蛋白中解離出來,經沉淀蛋白質后,銅離子與Cuprizone絡合,形成穩定的藍色絡合物,通過酶標儀檢測620nm處吸光度,形成的藍色與血清、血漿銅成線性關系,與標準品比較,根據公式計算出銅含量。該檢測試劑盒在62.8μmol/L以下線性關系良好,特異性高,較為靈敏。本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產品組成:
產品名稱 | 100T | 保存條件 |
試劑(A): 銅標準(100μg/ml) | 1ml | 4℃,避光 |
試劑(B): 銅標準稀釋液 | 5ml | 室溫 |
試劑(C): Cu酸化液 | 15ml | 室溫 |
試劑(D): Lea蛋白沉淀液 | 25ml | 4℃,避光 |
試劑(E): Cu Assay buffer | 2×10ml | 4℃ |
試劑(F): Cuprizone顯色液 | 1.2ml | 4℃,避光 |
試劑(G): ddH2O | 10ml | 室溫 |
自備材料:
1. 1.5ml離心管或試管
2. 離心機
3. 96孔板
4. 酶標儀
操作步驟 (僅供參考) :
1. 制備銅標準工作液:取適量銅標準(100μg/ml),按銅標準(100μg/ml):銅標準稀釋液=1:49的比例配制銅標準(2μg/ml),即為銅標準工作液。配制好以后,4℃避光保存3個月有效。
2. 制備樣品:血漿、血清按照常規方法制備,可以直接用于本試劑盒的測定,-20℃凍存,用于Cu的檢測。
3. Cu檢測:最好選用經稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥試管或者一次性無菌聚乙烯1.5ml離心管,以及潔凈96孔板,如果無法達到上述要求,應盡量避免使用銅污染的器皿,按下表操作。
加入物 | 空白管/孔 | 標準管/孔 | 測定管/孔 |
ddH2O/μl | 200 | - | - |
銅標準(2μg/ml)/μ | - | 200 | - |
待測樣品/μl | - | - | 200 |
Cu酸化液/μl | 140 | 140 | 140 |
充分混勻,室溫放置10min。 | |||
Lea蛋白沉淀液/μl | 200 | 200 | 200 |
充分混勻,室溫放置10min,3000g離心10min,吸取各管上清液,取96孔板按下列步驟操作。 | |||
上述上清液/μl | 100 | 100 | 100 |
Cu Assay buffer/μl | 140 | 140 | 140 |
Cuprizone 顯色液/μl | 10 | 10 | 10 |
4. 混勻,室溫靜置20min,分光光度計620nm處檢測,以空白孔調零,讀取各孔吸光度,1h內比色完畢。
計算:
血漿、血清銅(μmol/L)=(A測定/A標準 )×31.4
式中:A測定=測定孔的吸光度值
A標準=標準孔的吸光度值
單位換算:銅標準(2μg/ml)=銅標準(31.4μmol/L)
μg/dl=μmol/L/0.157
參考區間:成年健康人血清銅:男性:10.99~21.98μmol/L(70-140μg/dl)
女性:12.56~23.55μmol/L(80-150μg/dl)
注意事項:
1. 如果樣品濃度過高,應用去離子水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數。
2. 實驗過程中用到的水,不可用普通的蒸餾水,盡量采用高純度的去離子水。
3. 玻璃器材盡量用10%的鹽酸浸泡24h,取出后用去離子水沖洗后才可以使用。
4. 試驗中儀器、試管、注射器等盡量避免銅污染。
5. 本試劑盒呈色穩定,顯色后在4-20℃可穩定1h。隨著時間的延長,顏色會慢慢加深,應在1h內比色完畢。
6. Cu Assay buffer應密閉保存,用完立即蓋緊蓋子,防止有效成分揮發。
有效期:12個月有效。
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