組織無機磷含量檢測試劑盒（可見分光光度法）

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

產(chǎn)品貨號：BA1481

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體10mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入20 mL蒸餾水，充分溶解后加入試劑二(全部)，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，1mmol/L無機磷標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。

產(chǎn)品說明：

無機磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等等，此外促進碳水化合物的合成、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)運。

鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測定660nm光吸收，即可計算無機磷含量。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

操作步驟：

一、無機磷提取：

稱取約0.1g組織，加試劑一1.0 mL冰上充分勻漿，4℃，10000rpm，離心10min，取上清液，置冰上待測。

二、測定：

1. 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長到660nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 打開水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。

2. 測定：

分別混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度，分別記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A測定管。

注意：需在40min內(nèi)完成比色，空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

三、組織無機磷含量計算：

無機磷含量(mmol/g 樣本鮮重)= [C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V總÷W

=0.001×(A測定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液：1mmol/L；V總：上清液總體積，1mL=0.001 L；W：樣品質(zhì)量，g。

注意事項：

1、試劑三需臨用前配制，限當(dāng)天使用。

2、測定前先用1~2個樣品做預(yù)實驗，如吸光值大于0.8，需用蒸餾水做相應(yīng)稀釋。