流式細胞儀應用分類:
1、在腫瘤學中的應用
發現癌前病變,協助腫瘤早期診斷;在腫瘤的診斷、預后判斷和治療中的作用。
這是FCM在臨床醫學中應用早的一個領域。首先需要把實體瘤組織解聚、分散制備成單細胞懸液,用熒光染料(碘化吡啶PI)染色后對細胞的DNA含量進行分析,將不易區分的群體細胞分成三個亞群(G1期,S期和G2期),DNA含量直接代表細胞的倍體狀態,非倍體細胞與腫瘤惡性程度有關。
2、在臨床中的作用
FCM通過熒光抗原抗體檢測技術對細胞表面抗原分析,進行細胞分類和亞群分析。這一技術對于人體細胞免疫功能的評估以及各種血液病及腫瘤的診斷和治療有重要作用。有大量文章介紹了淋巴細胞亞群等在各種疾病中的變化。正常人群淋巴細胞T4/T8比值大約為2∶1,但在人體細胞免疫力低下時可出現比例倒置。用FCM還可以監測腎移植后病人的腎排斥反應,如果T4/T8比例倒置,病人預后良好,較少發生腎排異現象;反之排異危險性增加。同樣此種測定技術也用于艾滋病的診斷和治療中。還有作者報告了外周血淋巴細胞免疫表型的參考值,并對其種族、性別、年齡等影響因素進行了探討。
3、在血液病診斷和治療中的應用
FCM通過對外周血細胞或骨髓細胞表面抗原和DNA的檢測分析,對各種血液病的診斷、預后判斷和治療起著舉足輕重的作用。
(1)白血病的診斷和治療
(2)其它種類血液病的診斷和治療監測
(3)網織紅細胞的測定及臨床應用
4、在血栓與出血性疾病中的應用
(1)血小板功能的測定:正常情況下血小板以分散狀態在血管內運行,但當血管損傷、血流改變或受到化學物質刺激時血小板被活化而發生一系列改變。由于血小板的活化程度可由血小板膜糖蛋白表達水平的高低來判斷,FCM測定血小板膜糖蛋白的表達情況成為檢查血小板功能的一種新手段[11]。該方法靈敏、特異性高。如果采用全血法測定,只需微量標本,適合于兒童及血小板減少性疾病的患者[12]。 血小板活化時其質膜糖蛋白較其靜止期發生顯著改變,FCM可以通過單抗免疫熒光標記(血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa,CD62,CD63等)監測血小板功能及活化情況,有利于血栓栓塞性疾病的診斷和治療。
此外血小板活化時其細胞內的鈣離子濃度發生很大變化,借助于鈣離子敏感熒光探針的幫助,用FCM測定鈣離子濃度,可以作為活化血小板監測的非免疫性指標。
(2)血小板相關抗體的測定:免疫性血小板減少性紫癜病人血漿中可產生血小板自身抗體,結合在血小板表面,稱為血小板相關抗體,其分子可以是IgG、IgA或IgM,用羊抗人IgG、IgA、IgM熒光抗體標記被測血小板,FCM可以測定血小板相關抗體含量。直接法檢測血小板表面的相關抗體,間接法可測定血清中的相關抗體。流式細胞儀該方法用于該病的診斷及治療監測,具有檢測速度快、靈敏度高的優點。
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