詳細介紹
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2)根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4)γ干擾素elisa試劑盒 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證”,每一個產品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
具有如下優點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節省實驗經費。
anti- AHSG antibody大鼠神經生長因子(NGF)ELISA試劑盒
anti- AICDA antibody大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒
anti- AIDA antibody大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒
anti- AIF antibody大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒
anti- AIF1 antibody大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒
anti- AIFM3 antibody大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒
anti- AIG1 antibody大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒
anti- AIM2 antibody大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
anti- AIP/ARA9 antibody大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
anti- AIPL1 antibody大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒
anti- AIRE antibody大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒
anti- Ajuba antibody大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒
anti- AK1 antibody大鼠Smad7 ELISA試劑盒
anti- AK2 antibody大鼠Smad1 ELISA試劑盒
anti- AK2 antibody大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒
γ干擾素elisa試劑盒 小鼠基質金屬蛋白酶 -9(mouse MMP-9)Human DCP(Des-gamma carboxyprothrombin) ELISA Kit
Human WNT3A(Protein Wnt-3a) ELISA Kit
小鼠神經生長因子 (mouse NGF)Human SMAD2(Mothers against decapentaplegic homolog 2) ELISA Kit
Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit
小鼠骨橋蛋白 ( mouse Osteopontin)Human PPRC1(Peroxisome prolifeRator-activated receptor gamma coactivator-related protein 1) ELISA Kit
Human CD24(Signal transducer CD24) ELISA Kit
小鼠血小板衍化生長因子 (mouse PDGF-AA)Human RPESP(RPE-spondin) ELISA Kit
Human SEMA3G(Semaphorin-3G) ELISA Kit
小鼠血小板衍化生長因子 -B(mouse PDGF-AB)Human ZG16B(Zymogen granule protein 16 homolog B) ELISA Kit
Human ZG16(Zymogen granule membrane protein 16) ELISA Kit
小鼠血小板衍化生長因子 -BB(mouse PDGF-BB)Human LDHA(L-lactate dehydrogenase A chain) ELISA Kit
Human LDHC(L-lactate dehydrogenase C chain) ELISA Kit
小鼠趨化因子 (mouse RANTES)Human UCN(Urocortin) ELISA Kit
Human SOD3(Extracellular superoxide dismutase [Cu-Zn]) ELISA Kit
小鼠干細胞因子 (mouse SCF)Human GP6(Platelet glycoprotein VI) ELISA Kit
Human LPCAT3(Lysophospholipid acyltransferase 5) ELISA Kit
mouse SDF-1 aHuman OXM(Oxyntomodulin) ELISA Kit
Human AQP9(Aquaporin-9) ELISA Kit
小鼠可溶性 E- 選擇素 (mouse sE-Selectin/ sCD62E)Human SOD2(Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial) ELISA Kit
Human AKR1B1(Aldose reductase) ELISA Kit
小鼠可溶性 L- 選擇素 (mouse sL-Selectin/ sCD 62L )Human ADIPOR1(Adiponectin receptor protein 1) ELISA Kit
Human PRDX1(Peroxiredoxin-1) ELISA Kit
小鼠可溶性 P- 選擇素 (mouse sP-Selectin/ sCD62P)Human ITGB1(Integrin beta-1) ELISA Kit
Human MEP1A(Meprin A subunit alpha) ELISA Kit
小鼠轉化生長因子 -β1 (mouse TGF-β1)Human BMX(Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX) ELISA Kit
Human LPCAT2(Lysophosphatidylcholine acyltransferase 2) ELISA Kit
小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子 -1(mouse TIMP-1)Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA Kit
Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA Kit
小鼠腫瘤壞死因子 - a (mouse TNF- a )Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA Kit
Human APLN(Apelin) ELISA Kit
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。