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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
陰道 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8543 |
細胞簡介：
小鼠陰道平滑肌分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個富有彈性的管狀器官。它在生殖過程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經血、娩出嬰兒的必經之路，也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學由外到內分三層，即黏膜層、肌層和外膜。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在機體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。陰道平滑肌分離自陰道壁肌層組織，平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠陰道平滑肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的小鼠陰道平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠陰道平滑肌體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISAKit ELISA.
豬低分子肝素(LMWH)ELISAKit ELISA.
豬單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISAKit ELISA.
雙氫睪(DHT)ELISAKit ELISA.
CSRNP3蛋白抗體
干擾素α6抗體
TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 (His 標簽) Protein
Des(Desmin 0.5mgDes(Desmin) 結蛋白抗原
S100P重組人 S100P / S100E 蛋白 Protein
ALPI Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白 (His 標簽)
TNFRSF21 Protein Mouse 重組小鼠 DR6 / TNFRSF21 蛋白 (His 標簽)
Des(Desmin 0.5mgDes(Desmin) 結蛋白抗原
ALPI Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白 (His 標簽)
TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 (His 標簽) Protein
TNFRSF21 Protein Mouse 重組小鼠 DR6 / TNFRSF21 蛋白 (His 標簽)
S100P重組人 S100P / S100E 蛋白 Protein
豬催乳素(PRL)試劑盒
Human macrophage chemotatic factor (MCF) ELISA Kit 人巨噬細胞趨化因子(MCF)試劑盒
Porcinemyeloperoxidase,MPOELISAKit 豬髓過氧化物酶(MPO)試劑盒分裝
CLIAKitforAlpha1-AGP(HumanAlpha1-Acidglycoprotein)ELISAKit人α1酸性糖蛋白
血液0酸二酯酶2(PDE2)活性熒光定量試劑盒10次
Mouseβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)試劑盒
小鼠陰道平滑肌細胞小鼠癌胚抗原(CEA)試劑盒
Rat adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 大鼠能a1A受體(ADRA1A)試劑盒
HumancrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit 人Ⅰ型膠原N末端肽(X)試劑盒分裝
HumancathepsinD,cath-D試劑盒人組織蛋白酶D(cath-D)試劑盒
轉基因油菜(canola)OXY235品系試劑盒20次
humansimilaocDNAsequenceBC027382ELISAKit人類似cDNA順序BC027382試劑盒
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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