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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
尿道 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8516 |
細胞簡介：
小鼠尿道平滑肌分離自尿道管組織；尿道是從膀胱通向體外的管道。起自膀胱的尿道內口，止于尿道外口，行程中通過前列腺部、膜部和陰莖海綿體部，尿道在尿道膜部有一環橫行紋肌構成的括約肌，稱為尿道外括約肌，由意識控制。尿道有三個解剖上的較狹部和膨大部，前者分別位于外口、膜部和內口，后者位于舟狀窩、球部和前列腺部。尿道壁為粘膜層、粘膜下層和肌肉層所組成。在前尿道的外面，還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部)，一部分為多列或復層柱狀上皮，在有尿道海綿體的一部分尿道，主要為復層柱狀上皮，在皺襞上也有單層柱狀上皮。特別在舟狀窩內有許多環狀細胞，舟狀窩的遠端部開始有未角化的復層鱗狀上皮。粘膜下層血液供應豐富，主要為結締組織。肌肉層有縱行肌和外環形肌。
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠尿道平滑肌采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過平滑肌細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的小鼠尿道平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠尿道平滑肌體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
增殖誘導配體 英文名稱： a proliferation-inducing ligand 英文縮寫： APRIL
水通道蛋白-4 英文名稱： Aquaporin-4 英文縮寫： AQP-4
乙酰受體抗體 英文名稱： ai-acetylcholine receptor 英文縮寫： AChR-Ab
環0酸腺苷 英文名稱： cyclic adenosine monophosphate 英文縮寫： cAMP
NK細胞受體2A抗體
FOXI2蛋白抗體
BTLA重組大鼠 BTLA 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein
Collagen III (Anti--Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti--Collagen Type III ) Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
OSM重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標簽) Protein
ACO2 Protein Human 重組人 ACO2 / Aconitase 2 蛋白 (His & GST 標簽)
CD22僀?僀
Collagen III (Anti--Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti--Collagen Type III ) Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)
ACO2 Protein Human 重組人 ACO2 / Aconitase 2 蛋白 (His & GST 標簽)
BTLA重組大鼠 BTLA 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein
CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His 標簽)
OSM重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標簽) Protein
植物赤3(GA3)ELISA 試劑盒
Human ai respiratory syncytial virus aibody (RSV) ELISA Kit 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)試劑盒
PorcineHistamine,HISELISAKit 豬組胺(HIS)試劑盒分裝
ADVIgMXI腺病毒IgMⅪ型(間接法二步法)
血液(NO)活性比色法定量試劑盒50次
MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒
小鼠尿道平滑肌細胞大鼠輔肌動蛋白α2(ACTN2)試劑盒 ，英文名： ACTN2 ELISA Kit
Rat beta defensin (beta -Defensins) ELISA Kit 大鼠β-防御素(β-Defensins)試劑盒
Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 大鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒分裝
CLIAKitfordsDNA(Humanai-doublesandedDNA)ELISAKIT人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體
細胞培養液氧化應激活性氧(ROS)紅色熒光測定試劑盒(超氧陰離子)20次
RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑盒
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