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低密度脂蛋白膽固醇檢測實驗服務意義:
膽固醇在血液中常以脂蛋白的形式存在 ,而血漿中低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,LDL)是運輸內源性膽固醇的主要載體,其通過結合其細胞膜上的低密度脂蛋白受體(LDL-R) 被降解和轉化。低密度脂蛋白膽固醇(Low-Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)是由LDL-C是空腹血漿中的主要脂蛋白,約占血漿脂蛋的2/3,是運輸膽固醇到肝外組織的主要運載工具 。LDL-R功能缺陷會造成血漿LDL-C的清除能力降低, 終導致動脈內膜粥樣斑塊形成。因此,LDL-C的含量與心血管疾病的發病率及病變程度相關,被認為是動脈粥樣硬化的主要致病因子,其濃度與冠心病的發病率有明顯正相關,也是評價個體冠心病發生的危險因素的一個重要指標 。
低密度脂蛋白膽固醇檢測實驗服務樣本處理:
①、血清(漿);直接測定,如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。
②、培養液樣本:吸取培養液,1000轉1分, 離心10分鐘,取上清測定。
[注|; - -般議細胞密在100萬個/ml以上。
③、組織樣本:準確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1: 9的比例,加入9倍體積的勻漿介質,冰水浴條件下機械勻漿,2500 轉/分,離心10分鐘,取上清液待測。
④、細胞樣本:
A.細胞收集:將制備好的細胞懸液取出,1000 轉1分,離心10分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;用等滲緩沖液(*0.1mol/L、pH7~7.4磷酸鹽緩沖液)清洗1~2次,同樣1000轉/分,離心10分鐘,棄上液,留細胞沉淀;
B、細胞破碎:加入0.2~0.3ml的勻漿介質(*0.1mol/L、pH7~7.4磷酸鹽緩沖液或生理鹽水)進行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率: 300W,3~5秒/次,間隔30秒,重復3~5次)或手動勻漿,制備好的勻漿液不離心待測。也可采用裂解液裂解(*TritonX-100,1~2%,裂解30~40分鐘),裂解好的液體不離心直接測定。
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