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chip蛋白實驗技術服務
上海伊萊博生物科技有限公司成立于2005年,公司位于上海長江軟件園,實驗室面積600多平方米。公司目前具備較好的的生物學、醫(yī)學技術服務平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產服務。
chip蛋白實驗技術服務操作流程:
1 、樣品準備與交聯(lián)
細胞收集后,用37%的formaldehyde處理細胞,交聯(lián)核酸與DNA結合蛋白;
2. 超聲打斷染色質
裂解細胞,用Bioruptor將染色質超聲破碎成200-1000bp片斷;將片段分為兩份,一份用于免疫共沉淀,一份用于對照。
3 、免疫共沉淀 (IP)
取B步驟所得一份片斷與ChIP特異抗體結合進行免疫共沉淀,利用免疫磁珠法富集抗體復合物。
4 、解交聯(lián)及純化 DNA
將富集的DNA/蛋白復合物解交聯(lián)釋放DNA的片段,并進行純化(IP DNA);B步驟所得用于對照(Input DNA)的片斷作不進行IP實驗,但也要解交聯(lián)并純化。
5 、 DNA 段 PCR 擴增
針對ChIP DNA, Input DNA及對照DNA的目的片段設計特異性引物并進行熒光定量PCR擴增。
6 、結果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]
如果你想了解本公司的Chip蛋白實驗技術服務或者其他產品,咨詢,我們將熱情為您服務。
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