詳細介紹
盡管進行了大量研究,但事實證明分離純凈的細胞外囊泡 (EV) 制劑仍具有挑戰(zhàn)性。在此,我們比較了離子交換色譜法(IEC)和廣泛使用的蔗糖密度梯度離心法(SDG)來純化EVs。通過差速離心法從匯集的正常人羊水(AF)中分離出大量的EVs,然后進行IEC或蔗糖密度梯度分離。通過電泳和凝集素印跡/免疫印跡來監(jiān)測總蛋白、不同的EVs標記物和選定的N-聚糖的分布,從而評估分離出的EVs的純度。我們的數(shù)據(jù)顯示,帶負電荷的 EV 與其他帶不同電荷的分子能有效分離,而使用 SDG 離心法對 EV 進行的比較分析表明,陰離子交換色譜法在 EV 純化方面具有優(yōu)勢。最后,雖然這種基于 IEC 的方法是通過 AF 驗證的,但該方法也可用于從其他來源分離 EVs。