FLUO-EV是穩定表達熒光蛋白EGFP（綠色）和mCherry（紅色）與四泛蛋白CD63和CD9融合蛋白的胞外囊泡。FLUO-EV 是通過切向流過濾（TFF）和尺寸排阻色譜法（SEC）從基因工程細胞中純化出來的，以共同表達 CD63-EGFP 和 CD9-mCherry。FLUO-EVs 顯示出熒光團的高穩定性，可用于體外跟蹤研究，或作為納米顆粒分析儀的參考材料，或用于檢測校準。

細胞外囊泡（EVs）是一種脂質膜結合的顆粒，通過傳遞生理過程所必需的調節分子參與細胞間的交流。由于細胞外囊泡能有效載運特定的貨物分子，因此被認為是治療藥物的合適載體。藥物可以通過主動的外源策略或對產生囊泡的細胞進行基因修飾來裝載到 EVs 中。為了生產輸送治療蛋白的EVs，我們對HEK293和腫瘤細胞進行了基因改造和比較。在 HEK293 中，基于四聚碳酸酯的 RFP 融合蛋白更加穩定，并優先分選到 EV 中。從轉基因 HEK293 細胞介質中分離出的 EV 被癌細胞捕獲，有效地運送了它們的貨物。在 CD9/CD81 和 RFP 之間引入的 Cathepsin B 裂解位點被腫瘤特異性蛋白酶識別，使報告蛋白得以釋放。我們的研究結果表明，HEK293 細胞是產生 EVs 的系統，為開發納米平臺向腫瘤細胞高效遞送治療蛋白和原藥鋪平了道路。