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概述

超彈性骨™是由 Dimension Inx 制成的一種材料，由超過 90% 的羥基磷灰石組成，羥基磷灰石是一種來自骨組織的天然礦物質(zhì)。超彈性骨™在室溫下打印，打印后可以接種細(xì)胞。使用此分步方案使用超彈性骨骼對(duì)骨組織進(jìn)行生物打印。

下面用戶說明中提供的推薦制劑產(chǎn)生了一種簡(jiǎn)化的可打印生物材料，可創(chuàng)建可重復(fù)的 3D 生物打印結(jié)構(gòu)。但是，用戶可以根據(jù)自己的需要修改準(zhǔn)備工作。

材料

• 3 mL Dimension Inx 超彈性骨™（注：本產(chǎn)品已停售）

• 生物墨水混合器

• 5 mL 注射器

• 14G金屬拉絲針

• 27G金屬印針

• 砂紙印刷面

• 間充質(zhì)干細(xì)胞

• 間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基

骨組織生物打印方法

印刷：

1. 將小瓶從 4°C 中取出，使其達(dá)到室溫;

2. 材料從冰箱中取出時(shí)看起來會(huì)變硬，因此在處理之前請(qǐng)等待它看起來是流動(dòng)的（這可能需要一個(gè)多小時(shí)，并且根據(jù)室溫而有所不同）;

3. 使用生物墨水混合器劇烈渦旋材料，直到其均勻（這可能需要幾分鐘）;

• 注意：如果材料溶劑似乎大部分與粉末分離，您可以用膠帶將小瓶固定在渦旋混合器上，并保持至少一小時(shí)。長(zhǎng)時(shí)間混合小瓶將獲得更好的打印體驗(yàn)。

4. 使用 14G 針頭刺穿樣品瓶蓋并繪制打印量 （3 mL），不要將樣品瓶倒置以防止材料損失。超彈性骨™骼具有高度粘性，因此加載可能需要幾分鐘。我們建議您僅將此樣品瓶用于一次打印會(huì)話。如果您將其用于更多會(huì)話，請(qǐng)確保將其適當(dāng)密封。建議將刺破的蓋子換成實(shí)心蓋子，以便更好地進(jìn)一步存放;

5. 拉拔材料后，取下注射器柱塞和拉絲針;

6. 從柱塞上取下塞子并將其放入注射器中;

7. 將塞子放回注射器中，用柱塞推動(dòng)它，直到它接觸并均勻分布在注射器中的拉出材料。確保在用柱塞推動(dòng)塞子時(shí)，它們不會(huì)重新連接;

8. 放置 27G 打印針并裝入您的 Allevi！

9. 將粘合劑打印表面放在培養(yǎng)皿上。

印后：

1. 在處理之前，讓您的打印結(jié)構(gòu)在通風(fēng)櫥中靜置至少 2 小時(shí)。請(qǐng)注意，打印件在洗滌前可以無限期地存放在密封的玻璃容器中;

2. 將打印的結(jié)構(gòu)浸入 70% 乙醇中至少 1 小時(shí)。建議輕柔攪拌。更換乙醇，讓您的物體再浸入水中一個(gè)小時(shí);

3. 用PBS（用于生物應(yīng)用的無菌PBS）代替乙醇，并立即使用。如果您想存儲(chǔ)此對(duì)象，請(qǐng)將其冷凍在 -20 ?C、– 40 ?C 或 -80 ?C;

4. 如果您沒有使用我們的盤子并且您的結(jié)構(gòu)與您的表面融合，請(qǐng)小心地使用剃須刀片將其取下。如果您確實(shí)使用過我們的盤子，只需戴上手套取下您的結(jié)構(gòu)即可;

5. 如果您愿意，您可以用剪刀、手術(shù)刀、活檢打孔機(jī)等切割您的指紋。

細(xì)胞接種：

1. 從打印的結(jié)構(gòu)中吸出多余的液體，但不要讓它干燥。細(xì)胞接種時(shí)應(yīng)略微濕潤(rùn);

2. 10-15 μL 應(yīng)接種在直徑 5 mm、厚 1 mm 的印刷構(gòu)建體中;

3. 凝膠也可以注射到生物打印和洗滌的物體中。

打印設(shè)置

速度 （mm/s）	層高 （mm）	噴嘴直徑 （mm）	軌距
26	0.2	0.2	27

壓力 （psi）	交聯(lián)（秒）	打印溫度 （°C）
~30-40	0	室溫

生物打印骨組織的警告

• 不要將液體形式的超彈性骨™存放在塑料容器中數(shù)小時(shí)，否則會(huì)變干。打印前盡量限制所有空氣暴露，以確保佳打印體驗(yàn);

• 使用比提供的針頭規(guī)格更高（噴嘴直徑更小）的針頭進(jìn)行打印可能會(huì)導(dǎo)致間歇性堵塞;

• 不要讓液體形式的超彈性骨™長(zhǎng)時(shí)間接觸黑色金屬，它會(huì)腐蝕它們。

• 不要讓超彈性骨™與聚酯或聚苯乙烯接觸，它會(huì)與它們?nèi)诤稀?/p>

• 不要讓超彈性骨™達(dá)到 70 ?C 以上的溫度，否則它會(huì)融化。

• 不要試圖用熱、蒸汽、環(huán)氧乙烷或過氧化氫對(duì)打印結(jié)構(gòu)進(jìn)行滅菌。該材料含有二氯甲烷、2-丁氧基乙醇和鄰苯二甲酸二丁酯。

• 僅用于研究目的。不供人類或臨床使用。