詳細(xì)介紹
血液RNA DNA小量提取試劑盒提取系列
試劑盒組成包括血液RNA&DNA保護(hù)液(Buffer BR1, Cat#RP601),方便了樣品的分次收集、運(yùn)輸和保存。
血液樣品與Buffer BR1按照1:2.5的比例混合后室溫放置2小時(shí),樣品中的DNA和RNA被固化為容易被離心沉淀的粉末狀凝集物。
DNA吸附柱-RD選擇性吸附DNA,保留RNA于濾液中。濾液中加入乙醇調(diào)整結(jié)合條件后,RNA吸附柱-A有效吸附大分子RNA (包括mRNA和rRNA,不包括tRNA和降解為5S的小RNA)。
DNA吸附柱-RD和RNA吸附柱-A分別洗滌后,使用去離子水或低鹽溶液分別洗脫DNA和RNA,可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
本試劑盒適合從≤1ml新鮮的人或哺乳動(dòng)物全血,≤3ml凍存的人或哺乳動(dòng)物全血中分別提取DNA和RNA,適合處理的血液為EDTA-K2抗凝血,不適合處理肝素或者檸檬酸抗凝的血液。
RNA產(chǎn)量與應(yīng)用: 3-8 μg RNA/ ml新鮮血液,1-2 μg RNA/ ml凍存血液;小洗脫體積15 μl。已去除大部分tRNA和降解為5S的小RNA,可直接用于5`RACE和3`RACE。
DNA產(chǎn)量與應(yīng)用:5-10 μg DNA/ ml血液;小洗脫體積50 μl。純度低于血液基因組DNA提取系列試劑盒,可用于酶切和常規(guī)PCR。
本試劑盒也適合從動(dòng)物糞便和軟體動(dòng)物腸道內(nèi)容物中提取病毒RNA和DNA。
生理鹽水分散樣品,離心上清中含病毒RNA和DNA。離心上清與Buffer BR1按照1:2.5的比例混合后室溫放置2小時(shí),樣品中的DNA和RNA被固化為容易被離心沉淀的粉末狀凝集物,此過程可去除絕大部分PCR抑制成分。后續(xù)操作與處理血液樣品相同。
從0.4ml新鮮全血中提取RNA
洗脫體積25 μl,電泳體積2 μl,1×TAE,2% agarose,6.7 V/cm 15 min
從新鮮血液中獲得的RNA無明顯的基因組DNA和5S RNA。
在非變性瓊脂糖凝膠中,28S RNA、18S RNA和5S RNA分別與2000 bp DNA、750 bp和100 bp DNA遷移率相似。
血液RNA DNA小量提取試劑盒提取系列創(chuàng)凌生物現(xiàn)貨供應(yīng)!